Anticorpo policlonale anti-PDE4A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27815

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PDE4A

• PDE4A, nota anche come fosfodiesterasi 4A specifica per cAMP, è un membro della famiglia delle fosfodiesterasi 4 che idrolizza specificamente il secondo messaggero AMP ciclico 3',5' (cAMP) in AMP, riducendo così le vie di segnalazione del cAMP.
• L'enzima svolge un ruolo critico nella segnalazione cellulare controllando le concentrazioni intracellulari di cAMP, influenzando processi come l'infiammazione, la contrazione del muscolo liscio e la funzione cognitiva.
• PDE4A è caratterizzata dalla sua indipendenza dai livelli di calcio, calmodulina e cGMP; non idrolizza il cGMP, distinguendola da altre fosfodiesterasi.
• Il gene subisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme con caratteristiche regolatorie distinte e distribuzioni tissutali.
• A livello subcellulare, PDE4A si localizza nel citoplasma, nella regione perinucleare, nel citosol, nella membrana e nelle proiezioni cellulari come le membrane a ruffle, indicando il coinvolgimento nella segnalazione del cAMP compartimentalizzata.
• È altamente espressa in organi tra cui fegato, stomaco, testicolo, tiroide, ghiandole surrenali, cuore e intestino tenue, nonché in vari sottogruppi di cellule immunitarie come le cellule T, le cellule dendritiche, i macrofagi e i mastociti.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, l'ubiquitinazione e la formazione di legami isopeptidici, con la proteina che lega ioni manganese e zinco come cofattori.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• La sequenza immunogenica (aminoacidi 325-410) corrisponde a una regione all'interno del dominio catalitico; verificare la specificità dell'anticorpo contro le isoforme desiderate utilizzando WB con proteine ricombinanti o lisati cellulari di specie pertinenti.
• Per WB, è prevista una banda intorno a 98 kDa; considerare l'uso di lisati di controllo positivo da tessuti con alta espressione di PDE4A (es. fegato, cuore) o da cellule immunitarie stimolate.
• In IHC-P e IF/ICC, includere controlli tissutali sia negativi che positivi (es. tessuti umani o roditori con pattern di espressione noti) e ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere un'attenta titolazione per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale; la reattività incrociata con topo e ratto supporta saggi multi-specie, ma convalidare sempre nel proprio specifico sistema sperimentale.

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