Anticorpo policlonale anti-PDE4D per WB, ELISA - Q08499

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e localizzazione del PDE4D

• Il PDE4D è una fosfodiesterasi specifica per cAMP che idrolizza il secondo messaggero cAMP, un regolatore critico di numerosi processi fisiologici inclusa la segnalazione cellulare e il metabolismo.
• La proteina appartiene alla famiglia di fosfodiesterasi PDE4, caratterizzata dalla loro alta affinità e specificità per il cAMP.
• Il PDE4D viene espresso come multiple isoforme tramite splicing alternativo, contribuendo alla diversità funzionale e alla regolazione specifica del tessuto.
• A livello subcellulare, il PDE4D si localizza alla membrana cellulare apicale, al citoplasma e a specifiche strutture del citoscheletro inclusi il centrosoma e il centro di organizzazione dei microtubuli, suggerendo ruoli nella segnalazione cAMP localizzata.
• L'espressione tissutale è diffusa, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico; è anche rilevato nel cervello, placenta, polmone, rene, cuore e cellule epiteliali del colon, indicando un ampio coinvolgimento fisiologico.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, la formazione di legami isopeptidici e l'ubiquitinazione, che possono modulare la sua attività, stabilità e interazione con complessi di segnalazione.
• Il gene PDE4D è associato all'acrodisostosi (ACRDYS2) e alla suscettibilità all'ictus (STRK1) quando è mutato, evidenziando la sua rilevanza clinica.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale (aa 249-518) del PDE4D, che include parte del dominio catalitico; questo design può permettere il rilevamento di multiple isoforme, ma è raccomandata la validazione specifica per isoforma.
• Per il Western blotting, è prevista una banda intorno a 91 kDa nei campioni umani e di ratto, sebbene le bande specifiche per isoforma possano variare; utilizzare controlli di carico appropriati e considerare i pattern di espressione specifici del tessuto.
• Nell'ELISA, la natura policlonale può fornire un segnale robusto, ma è consigliabile l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento che targetizza un epitopo diverso per i saggi a sandwich.
• Dato l'associazione della proteina con le membrane e il citoscheletro, includere tamponi di lisi a base di detergenti per garantire un'efficace solubilizzazione.

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