Anticorpo policlonale di coniglio anti-PDE8A per WB, ELISA - O60658

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PDE8A

• PDE8A è una 3',5'-fosfodiesterasi ad alta affinità specifica per il cAMP e insensibile all'IBMX, nota anche come HsT19550, con molteplici isoforme generate mediante splicing alternativo (parole chiave UniProt: splicing alternativo).
• L'enzima idrolizza il secondo messaggero cAMP, svolgendo un ruolo chiave nella regolazione di numerosi processi fisiologici e nel mantenimento dei livelli basali di cAMP; è particolarmente coinvolto nella regolazione del cAMP durante lo sviluppo delle cellule germinali (PubMed:18983167). Riferimenti correlati: PMID:18983167
• PDE8A si lega a RAF1 e riduce la sua fosforilazione inibitoria in Ser-259, stimolando così la segnalazione ERK dipendente da RAF1 e attivata dall'EGF (PubMed:23509299). Riferimenti correlati: PMID:23509299
• Questa fosfodiesterasi protegge dalla morte cellulare indotta dal perossido di idrogeno e dalla staurosporina, evidenziando un ruolo nelle vie di sopravvivenza cellulare (PubMed:23509299). Riferimenti correlati: PMID:23509299
• L'analisi dell'espressione tissutale mostra che PDE8A è ampiamente distribuita, con i livelli più elevati in testicolo, ovaio, intestino tenue e colon; è assente nel timo e nei leucociti del sangue periferico.
• Le parole chiave UniProt la classificano come una fosfoproteina legante i metalli con una struttura 3D nota, supportandone la caratterizzazione funzionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–120 all'estremità N-terminale della PDE8A umana; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca epitopi all'interno di questa regione e possa rilevare tutte le isoforme contenenti questa sequenza.
• Per il Western blot (WB), si consiglia di utilizzare una serie di diluizioni per determinare la concentrazione di lavoro ottimale; il peso molecolare previsto è di circa 93 kDa, ma le modifiche post-traduzionali o le variazioni tra isoforme possono spostare la banda.
• Per le applicazioni ELISA, validare l'anticorpo contro la proteina ricombinante o nativa nella matrice del campione pertinente; è stata osservata reattività crociata con topo e ratto, pertanto queste specie possono essere prese in considerazione per studi multispecie.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata in modo indipendente e si raccomanda l'uso di controlli negativi appropriati per confermare la specificità del segnale.

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