Anticorpo Policlonale Anti-PDGFB per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01127

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PDGFB

• PDGFB, noto anche come PDGF-2, catena B del fattore di crescita derivato dalle piastrine, polipeptide beta e proto-oncogene c-Sis, è un fattore di crescita secretorio codificato dal gene PDGFB (sinonimi: PDGF2, SIS).
• Agisce come un potente mitogeno per le cellule mesenchimali, promuovendo proliferazione, migrazione, sopravvivenza e chemiotassi durante lo sviluppo embrionale e l'omeostasi tissutale. Riferimenti bibliografici: PMID:26599395
• PDGFB è essenziale per lo sviluppo vascolare normale: è necessario per la proliferazione e il reclutamento di periciti e cellule muscolari vascolari lisce nel sistema nervoso centrale, pelle, polmone, cuore e placenta, e per la formazione dei vasi sanguigni e dei glomeruli renali.
• Svolge un ruolo fondamentale nella guarigione delle ferite, dove stimola la chemiotassi e la proliferazione di fibroblasti e cellule muscolari lisce.
• La segnalazione di PDGFB è modulata tramite la formazione di eterodimeri con PDGFA (sottounità A del fattore di crescita derivato dalle piastrine), alterando il legame al recettore e gli effetti a valle.
• La proteina è secreta e contiene ponti disolfuro caratteristici e glicosilazione, che contribuiscono alla sua stabilità e dimerizzazione.
• L'espressione tissutale è massima nel cuore, nella substantia nigra del cervello, nella placenta e nel rene fetale, con livelli moderati nell'ippocampo, nel muscolo scheletrico, nel rene adulto e nel polmone.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 140–241 del PDGFB umano, che dovrebbe riconoscere sia la forma precursore che quella matura della proteina.
• Per Western blot (WB), è attesa una banda di circa 27 kDa in condizioni riducenti. In condizioni non riducenti, le forme dimeriche possono comparire a pesi molecolari più alti a causa dei ponti disolfuro intercatena; si consiglia di confrontare le condizioni riducenti e non riducenti per distinguere le popolazioni monomeriche e dimeriche.
• In immunistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), il recupero dell'antigene (ad es. buffer citrato a calore) è raccomandato a causa della natura secretoria di PDGFB; la permeabilizzazione è necessaria per la rilevazione intracellulare.
• Per ELISA, utilizzare un antigene di coating corrispondente alla regione dell'immunogeno o la proteina PDGFB ricombinante; eseguire una curva standard per determinare le concentrazioni ottimali dell'anticorpo di cattura e di rilevazione.
• La reattività crociata è riportata per materiale umano e di ratto; convalidare in topo o altre specie se necessario, poiché l'omologia di sequenza può variare.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati (ad es. lisato cellulare sovraesprimente PDGFB vs. knockout o tessuto noto per non esprimere la proteina) per confermare la specificità.

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