Anticorpo monoclonale anti-PDGFRa per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P16234

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del PDGFRa

• Il PDGFRa (recettore alfa del fattore di crescita derivato dalle piastrine) è un recettore tirosina-proteina chinasi per PDGFA, PDGFB e PDGFC, codificato dal gene PDGFRA nell'uomo. È noto anche come CD140A, PDGFR2 o recettore del fattore di crescita derivato dalle piastrine di tipo alfa.
• In seguito al legame con il ligando, il PDGFRa dimerizza e attiva molteplici cascate di segnalazione a valle, tra cui le vie PI3K/AKT, RAS-MAPK e PLCG1, regolando la proliferazione cellulare, la sopravvivenza, la chemiotassi e la differenziazione. Svolge ruoli fondamentali nello sviluppo embrionale, nella formazione dello scheletro e nello sviluppo della mucosa del tratto gastrointestinale.
• Il PDGFRa è una proteina transmembrana a singolo passaggio localizzata sulla membrana cellulare e presente anche nell'apparato di Golgi e nel ciglio primario. Contiene domini simili alle immunoglobuline nella regione extracellulare e un dominio tirosina-chinasico suddiviso nella regione intracellulare.
• Il recettore è ampiamente espresso, in particolare nei fibroblasti, nella muscolatura liscia, nel cuore, nel cervello e negli embrioni, ed è rilevato nelle piastrine e nei tumori del colon. La sua espressione è importante nella differenziazione delle cellule staminali mesenchimali e nella guarigione delle ferite.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'azoto, l'autofosforilazione dei residui di tirosina in seguito all'attivazione e l'ubiquitinazione, che regolano la sua segnalazione e la sua downregulation. È classificato come proto-oncogene e le sue mutazioni sono associate a tumori e disturbi dello sviluppo (ad esempio, i tumori stromali gastrointestinali).
• Il PDGFRa può formare eterodimeri con il PDGFRB, modulando la specificità e l'intensità del segnale a seconda dell'isoforma del ligando. La segnalazione del recettore viene attenuata dalle fosfatasi e dall'internalizzazione del recettore.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 24-528), pertanto è probabile che questo anticorpo riconosca la regione extracellulare. Tenere conto di questo aspetto nella progettazione degli esperimenti, ad esempio in condizioni non riducenti o per il rilevamento della proteina nativa.
• Per il Western blot (WB), il peso proteico previsto è di circa 123 kDa (può apparire come una banda intorno a 170-180 kDa a causa della glicosilazione). Validare nel sistema campione pertinente, poiché i livelli di espressione possono variare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare il recupero antigenico e la permeabilizzazione. La reattività crociata con topo e ratto ne consente l'utilizzo nei comuni organismi modello.
• Per ELISA e immunoprecipitazione (IP), assicurarsi che l'anticorpo sia compatibile con la conformazione nativa del target. Includere sempre controlli appropriati.

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