Anticorpo policlonale anti-PDGFRA/PDGFR alfa di coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16234

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del PDGFR alfa

• Il PDGFR alfa (CD140a, PDGFR2) è un recettore tirosin-chinasico di superficie cellulare codificato dal gene PDGFRA, che funge da recettore ad alta affinità per i fattori di crescita derivati dalle piastrine PDGFA, PDGFB e PDGFC.
• Il legame del ligando induce la dimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione, attivando importanti cascate di segnalazione a valle tra cui le vie RAS/MAPK, PI3K/AKT, PLCG1 e STAT per regolare la proliferazione cellulare, la sopravvivenza, la migrazione e la chemiotassi.
• Gioca un ruolo essenziale nello sviluppo embrionale, in particolare nello sviluppo scheletrico, nella chiusura cefalica e nella morfogenesi del tratto gastrointestinale, ed è necessario anche per la differenziazione delle cellule staminali mesenchimali.
• Esibisce ruoli duali dipendenti dal contesto, in grado di promuovere o inibire la proliferazione e la migrazione cellulare a seconda dell'ambiente cellulare e della composizione del ligando.
• È coinvolto nella guarigione delle ferite e nella biologia delle piastrine, contribuendo all'attivazione delle piastrine, alla secrezione di agonisti e all'aggregazione indotta dalla trombina.
• Esistono isoforme generate da splicing alternativo; il recettore canonico a lunghezza intera si localizza prevalentemente alla membrana cellulare, ma si trova anche nell'apparato di Golgi e nel ciglio primario, indicando un traffico intracellulare e una compartimentazione della segnalazione.
• È ampiamente espresso nei tessuti, con rilevamento nel cervello, nei fibroblasti, nel muscolo liscio, nel cuore, nelle piastrine e nei tessuti colici sia normali che tumorali, evidenziando i suoi ruoli sia nella fisiologia normale che nell'oncogenesi.
• Viene modificato post-traduzionalmente tramite fosforilazione, glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e ubiquitinazione, che regolano l'attività del recettore, la stabilità e l'output di segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre il dominio intracellulare (aa 896-1059), rendendo questo anticorpo adatto per rilevare il PDGFR alfa totale nel Western blotting in condizioni riducenti; la banda prevista è di ~123 kDa, ma la glicosilazione può causare uno spostamento.
• Per l'immunoistochimica su sezioni paraffinate (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore poiché i recettori di membrana possono essere mascherati; testare più buffer di recupero per ottimizzare il segnale.
• Quando utilizzato in immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta una colorazione membranosa e possibilmente perinucleare (Golgi); validare la specificità con controlli appropriati, come linee cellulari con knockdown o knockout di PDGFRA.
• Questo anticorpo può riconoscere sia il PDGFR alfa umano che quello roditore (topo/ratto), ma la reattività crociata con altre specie deve essere verificata sperimentalmente.
• Per l'ELISA, le prestazioni dipendono dal metodo di rivestimento e dall'abbinamento degli anticorpi; si consiglia un test preliminare con la proteina ricombinante PDGFR alfa per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali.

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