Anticorpo monoclonale anti-PDHA1 per WB, IF/ICC, ELISA - P08559

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PDHA1

• PDHA1 codifica la subunità alfa (E1) del complesso piruvato deidrogenasi, un enzima mitocondriale che converte il piruvato in acetil-CoA, collegando la glicolisi al ciclo dell'acido citrico. Riferimenti correlati: PMID:17474719, PMID:19081061, PMID:7782287
• Insieme a PDHB, forma la componente E1 eterotetramerica, che catalizza la decarbossilazione del piruvato dipendente da tiamina pirofosfato e l'acetilazione riduttiva dei gruppi lipoil sulla componente E2. Riferimenti correlati: PMID:17474719, PMID:19081061, PMID:7782287
• Espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti, riflettendo il suo ruolo di housekeeping nel metabolismo energetico cellulare.
• Localizzato nella matrice mitocondriale, dove il complesso PDH è attivo.
• Soggetto a fosforilazione e acetilazione regolatorie, che modulano l'attività enzimatica in risposta alle richieste metaboliche.
• Le mutazioni in PDHA1 sono associate a malattie mitocondriali primarie, inclusa la sindrome di Leigh, evidenziandone la rilevanza clinica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 50–150 della PDHA1 umana (P08559); la reattività incrociata con la PDHA1 di topo e ratto (Swiss-Prot P35486 e P26284) è prevista in base all'allineamento delle sequenze.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è 43 kDa; convalidare la rilevazione in frazioni arricchite di mitocondri o lisati cellulari totali da linee cellulari/tessuti pertinenti.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica, si consiglia di utilizzare un colorante mitocondriale per confermare la localizzazione subcellulare.
• Per ELISA, titrare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale utilizzando la proteina ricombinante PDHA1 o il complesso PDH come antigene di cattura.

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