Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PDIA6 per WB, IF/ICC, ELISA - Q15084

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PDIA6

• PDIA6 (protein disulfide-isomerase A6), indicata anche come ERP5, P5 o TXNDC7, appartiene alla famiglia delle protein disulfide isomerase e contiene domini di tiorredoxina.
• Funziona come chaperone molecolare che inibisce l'aggregazione delle proteine mal ripiegate, contribuendo alla proteostasi nel reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:12204115
• Regola negativamente la risposta alle proteine non correttamente ripiegate (UPR) legandosi a sensori della UPR come ERN1 (IRE1α) ed EIF2AK3 (PERK), attenuando così le loro cascate di segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:24508390
• Svolge un ruolo nell'aggregazione e nell'attivazione piastrinica in seguito alla stimolazione da parte di agonisti tra cui convulxina, collagene e trombina. Riferimenti correlati: PMID:15466936
• È localizzata prevalentemente nel lume del reticolo endoplasmatico, ma viene rilevata anche sulla membrana cellulare e nei melanosomi, suggerendo l'esistenza di diversi contesti funzionali.
• È espressa a livello proteico nelle piastrine; le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la formazione di ponti disolfuro, indicative di un'attività redox regolatoria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• La sequenza dell'immunogeno (amminoacidi 1-100 di PDIA6 umano) corrisponde alla regione N-terminale; può essere adatta per rilevare la proteina a lunghezza intera nei Western blot denaturanti. Per applicazioni native come IF/ICC, è necessario verificare l'accessibilità dell'epitopo.
• Nel Western blot, è prevista una banda intorno a 48 kDa; convalidare il rilevamento in linee cellulari come HEK293 o in lisati piastrinici.
• In immunofluorescenza, PDIA6 presenta un pattern di colorazione reticolare del RE; si raccomanda la co-localizzazione con un marcatore del RE per confermare la specificità.
• La reattività crociata dichiarata con topo e ratto deve essere verificata nel tessuto appropriato, poiché le variazioni di sequenza nella regione dell'immunogeno potrebbero influenzare il legame.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo di questo anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento dopo titolazione e validazione con PDIA6 ricombinante.
• Per studiare il ruolo di PDIA6 nella UPR, l'induzione dello stress del RE (ad esempio con tunicamicina) può modulare la sua espressione.
• Utilizzare condizioni riducenti per l'elettroforesi, in modo da tenere conto dei ponti disolfuro intramolecolari e ottenere il peso molecolare previsto.

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