Anticorpo policlonale di coniglio anti-PDK1/PDPK1 per WB ed ELISA - O15530

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PDK1/PDPK1

• PDK1 (protein chinasi 1 dipendente dai 3-fosfoinositidi) è una chinasi serina/treonina che funge da chinasi principale per la famiglia delle chinasi AGC, fosforilando e attivando molteplici bersagli a valle. Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762

• Attiva proteine chiave della segnalazione, come AKT/PKB, la chinasi p70 S6, p90 RSK, le isoforme di PKC, SGK e PAK1, svolgendo così un ruolo centrale nella trasduzione del segnale insulinico e nella regolazione della proliferazione cellulare, della sopravvivenza e del metabolismo. Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762, PMID:12167717, PMID:9094314

• PDK1 regola negativamente la segnalazione di TGF-beta modulando le interazioni e la fosforilazione delle proteine SMAD, impedendo l'accumulo nucleare di SMAD3 e SMAD4. Riferimenti correlati: PMID:17327236

• Attiva la via NF-kappa-B attraverso la fosforilazione di IKKB e regola la dinamica delle adesioni focali mediante fosforilazione della tirosina. Riferimenti correlati: PMID:16207722, PMID:14585963

• PDK1 è essenziale per la motilità e la chemiotassi delle cellule endoteliali vascolari, partecipa all'ingresso del calcio e alla funzione dei mastociti e svolge ruoli fondamentali nell'omeostasi cardiaca e nello sviluppo dei timociti. Riferimenti correlati: PMID:17371830

• A livello subcellulare, PDK1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nelle adesioni focali, consentendo le sue diverse funzioni di segnalazione.

• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione, la fosforilazione (in particolare Tyr-9, elevata nei tessuti patologici) e la coniugazione con l'ubiquitina.

• PDK1 è espressa ubiquitariamente e la forma fosforilata in Tyr-9 è significativamente aumentata nei tessuti patologici di polmone, fegato, colon e mammella rispetto ai tessuti normali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 409-556 di PDK1 umano, una regione situata nella porzione C-terminale del dominio chinasi. Considerare che l'anticorpo può riconoscere sia le forme non fosforilate sia quelle fosforilate di PDK1; gli specifici stati di fosforilazione devono essere validati indipendentemente.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 63 kDa. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e validare il rilevamento in lisati cellulari umani, murini o di ratto. Per l'ELISA, assicurarsi di ottimizzare le condizioni di rivestimento e la titolazione dell'anticorpo.
• Considerato il ruolo di PDK1 nella segnalazione dell'insulina e dei fattori di crescita, valutare la stimolazione delle cellule con insulina o siero per analizzare i cambiamenti correlati all'attivazione della via nell'espressione o nella fosforilazione di PDK1.

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