Anticorpo Policlonale Anti-PDK3 per WB, ELISA - Q15120

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del PDK3

• Il PDK3 codifica una piruvato deidrogenasi chinasi mitocondriale che inibisce il complesso della piruvato deidrogenasi attraverso la fosforilazione delle subunità alfa E1 PDHA1 e PDHA2, controllando così l'ingresso del piruvato nel ciclo dell'acido tricarbossilico.
• Questa chinasi agisce come un interruttore metabolico critico, riducendo l'utilizzo del glucosio e promuovendo l'ossidazione degli acidi grassi in risposta al digiuno prolungato o a una dieta ricca di grassi, il che aiuta a mantenere l'omeostasi del glucosio.
• Il PDK3 è una delle quattro isoforme PDK (PDK1-4) che regolano differenzialmente il complesso della piruvato deidrogenasi in vari tessuti e stati metabolici.
• Il pre-proteina PDK3 è indirizzata alla matrice mitocondriale, dove esercita la sua funzione regolatrice sul complesso della piruvato deidrogenasi.
• Il PDK3 è una chinasi legante l'ATP che appartiene alla famiglia delle transferasi; può anche contribuire alla generazione di specie reattive dell'ossigeno.
• L'espressione tissutale è notevolmente elevata nel cuore, nel muscolo scheletrico, nel midollo spinale e nel cervello fetale e adulto, coerente con il suo ruolo nella modulazione del metabolismo nei tessuti altamente ossidativi.
• Le varianti patogene del PDK3 sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth, una neuropatia periferica, evidenziando la sua importanza nella funzione neuronale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 137-406 del PDK3 umano, coprendo una parte sostanziale del dominio chinasi; questa progettazione potrebbe riconoscere sia la forma a lunghezza intera che possibili isoforme splicing alternative.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati proteici da tessuti con alta espressione di PDK3 come cuore, muscolo scheletrico o cervello; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo basandosi su esperimenti preliminari.
• Nell'ELISA, valutare protocolli diretti o indiretti con proteina PDK3 ricombinante o lisati cellulari per confermare la specificità di legame.
• Dato il peso molecolare previsto di ~47 kDa, assicurare un'adeguata separazione su gel e verificare l'identità della banda con appropriati controlli positivi e negativi.
• È riportata la reattività crociata con il PDK3 di topo e ratto; validare nel sistema di campione pertinente se si lavora attraverso specie diverse.

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