Anticorpo policlonale coniglio Anti-PENK per WB, IF-P, ELISA - P01210

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proencefalina-A (PENK)

• La proencefalina-A (PENK) è una proteina precursore che subisce un processo di proteolisi per generare peptidi oppioidi attivi, tra cui Met-enkefalina, Leu-enkefalina e Met-enkefalina-Arg-Phe.
• Le enkefaline agiscono come ligandi endogeni dei recettori oppioidi e mimano gli effetti degli oppiacei, modulando quindi la percezione del dolore, le risposte allo stress e la dinamica dei neurotrasmettitori.
• La Met-enkefalina-Arg-Phe lega il recettore oppioide di tipo Mu OPRM1 nel nucleo accumbens per indurre la depressione sinaptica a lungo termine del rilascio di glutammato, contribuendo ai meccanismi di ricompensa e analgesia.
• Oltre alla classica segnalazione oppioide, i peptidi derivati da PENK agiscono anche come ligandi per il recettore MRGPRX1, innescando prurito e sensazioni nocicettive indipendenti dall'istamina (PubMed:11850634, PubMed:28223516). Riferimenti correlati: PMID:11850634, PMID:28223516
• L'attivazione di MRGPRX1 nei neuroni sensoriali periferici provoca prurito e graffi, mentre la segnalazione centrale di MRGPRX1 allevia il dolore cronico, rivelando un doppio ruolo funzionale (PubMed:11850634, PubMed:21593341, PubMed:28223516). Riferimenti correlati: PMID:11850634, PMID:21593341, PMID:28223516
• Subcellolarmente, PENK si localizza nelle vescicole secretorie citoplasmatiche, in particolare nei granuli cromaffini, e viene secreta nello spazio extracellulare.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali chiave, tra cui la formazione di legami disolfuro e la fosforilazione, che possono influenzare il suo processo di maturazione e le interazioni con i recettori.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 150-267 della PENK umana, che comprende la regione C-terminale contenente il motivo del peptide oppioide Met-enkefalina-Arg-Phe; l'anticorpo policlonale ottenuto è previsto che riconosca sia la proencefalina-A a lunghezza intera che i frammenti processati contenenti questo epitopo.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto della proencefalina-A è di circa 31 kDa; tuttavia, si possono osservare più bande a causa della maturazione proteolitica e di possibili modifiche post-traduzionali, quindi si raccomanda di ottimizzare la preparazione dei campioni.
• In immunofluorescenza (IF-P), poiché PENK è una proteina secreta localizzata nelle vescicole secretorie, le condizioni di permeabilizzazione e fissazione sono fondamentali per visualizzare le pools intracellulari; convalidare il pattern di colorazione in modelli cellulari o tissutali appropriati.
• Questo anticorpo presenta reattività crociata con la PENK di ratto, facilitando gli studi su modelli roditori; tuttavia, si consiglia la convalida specifica per specie.
• Essendo un anticorpo policlonale, le prestazioni possono variare tra lotti; titrare sempre l'anticorpo e includere controlli appropriati per ogni esperimento.

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