Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PEPCK/PCK2 (convalidato KO) per WB, IF/ICC, ELISA - Q16822

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PEPCK/PCK2

• Codificato dal gene PCK2, noto anche come PEPCK2 o PEPCK-M, questa proteina mitocondriale funge da fosfoenolpiruvato carbossichinasi (PEPCK) e da serina/treonina-proteina chinasi.
• Catalizza la conversione dell'ossalacetato in fosfoenolpiruvato, il passaggio limitante nella gluconeogenesi e gliceroneogenesi, utilizzando GTP come donatore di fosfato (PubMed:28955899). Riferimenti correlati: PMID:28955899
• La sua attività chinasica fosforila e attiva ACSL4, promuovendo così la ferroptosi, una forma di morte cellulare regolata (PubMed:38720107). Riferimenti correlati: PMID:38720107
• Appartiene alla famiglia delle carbossichinasi PEPCK, che svolgono ruoli critici nel metabolismo energetico e nell'omeostasi del glucosio.
• Si localizza esclusivamente nel mitocondrio, dove si integra nelle vie metaboliche del ciclo dell'acido citrico.
• Esprime ampiamente in diversi tessuti, in linea con le sue funzioni metaboliche di base ("housekeeping").
• Annotato con diverse parole chiave tra cui Acetilazione, Splicing alternativo, Decarbossilasi, Liasi, Manganese, Legame metallico, Legame nucleotidico e Peptide di transito, indicando una regolazione complessa e proprietà enzimatiche.
• Il peso molecolare è di circa 71 kDa, ma può variare a causa di modifiche post-traduzionali o splicing alternativo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 550-640); l'anticorpo può rilevare sia le forme a lunghezza intera che quelle troncate di PCK2, ma si raccomanda la convalida nei sistemi di campione rilevanti.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari umani, di topo o di ratto o frazioni mitocondriali come controlli positivi; ci si aspetta una banda vicina a 71 kDa.
• Per l'immunofluorescenza o ICC, i modelli di colorazione mitocondriale dovrebbero essere confermati con marcatori specifici per organelli.
• Grazie alla convalida KO, l'anticorpo può essere utilizzato in esperimenti di knockout/recupero per dimostrare la specificità del bersaglio.
• I protocolli ELISA possono richiedere l'immobilizzazione di PCK2 ricombinante o la cattura della proteina endogena da lisati; eseguire una titolazione nelle condizioni del proprio saggio.

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