Anticorpo policlonale anti-PER1 coniglio - O15534

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PER1

• PER1, noto anche come omologo 1 della proteina circadiana Period, è un repressore trascrizionale e componente centrale dell'orologio circadiano, un sistema di cronometraggio interno che genera ritmi di ~24 ore nell'espressione genica per regolare il metabolismo, il sonno, la temperatura corporea e altri processi fisiologici.
• L'orologio molecolare si basa su un ciclo di feedback trascrizione/traduzione (TTFL) in cui CLOCK o NPAS2 eterodimerizza con BMAL1 o BMAL2 per attivare i geni dell'orologio contenenti E-box, mentre le proteine PER e CRY si accumulano, formano complessi e reprimono la loro stessa trascrizione, creando oscillazioni ritmiche.
• PER1 interagisce con l'eterodimero CLOCK-BMAL1 per inibire la sua attività trascrizionale, regolando negativamente i geni centrali dell'orologio e i geni controllati dall'orologio, e reprime anche CRY2, impedendo la sua repressione dei geni bersaglio di CLOCK/BMAL1 come FXYD5, SCNN1A e PPARA.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, con pesi proteici osservati di circa 136 kDa e 92 kDa, coerenti con il peso molecolare eterogeneo rilevato.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare ma anche citoplasmatica, il che può riflettere un trasporto dinamico durante il ciclo circadiano.
• PER1 è ampiamente espresso nei tessuti umani, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, ed è presente anche nel cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, rene e altri organi; a livello proteico, è presente nei follicoli piliferi.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione e l'ubiquitinazione, regolano finemente la stabilità e l'attività di PER1, influenzando la durata del periodo dei ritmi circadiani.
• Oltre all'orologio centrale, PER1 modula l'attività del recettore dei glucocorticoidi, il riassorbimento renale di sodio, le vie neuroinfiammatorie e il ciclo del follicolo pilifero, evidenziando i suoi ruoli pleiotropici nella fisiologia.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aminoacidi 1-200) di PER1 umano; si prevede che l'anticorpo riconosca il PER1 a lunghezza intera e possibilmente isoforme troncate N-terminali.
• Per il Western blot, considerare che il PER1 endogeno può apparire come bande intorno a 136 kDa e/o 92 kDa a causa dello splicing alternativo; validare con appropriati controlli positivi (es. campioni con alta espressione di PER1 come il muscolo scheletrico).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), notare che PER1 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma; il segnale nucleare può essere più prominente in sistemi di cellule sincronizzate.
• Per le applicazioni ELISA, assicurarsi che la proteina ricombinante o il peptide utilizzato per il rivestimento sia compatibile con la regione immunogenica.
• Dato che le proteine circadiane mostrano un'espressione temporale, potrebbero essere necessari esperimenti in serie temporale per catturare i livelli di picco di PER1; considerare la sincronizzazione delle cellule con shock siero o desametasone prima dell'analisi.

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