Anticorpo policlonale anti-PER2 per WB, IHC-P, ELISA, ChIP - O15055

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PER2

• PER2 è un repressore trascrizionale e un componente centrale dell'orologio circadiano, che genera ritmi di circa 24 ore nell'espressione genica e regola il metabolismo, il sonno, la temperatura corporea e la funzione immunitaria.
• Funziona nel ciclo di feedback trascrizione/traduzione (TTFL) formando il braccio negativo: insieme a CRY1/2, inibisce l'attività dell'eterodimero CLOCK/NPAS2-BMAL1/BMAL2, reprimendo la propria espressione.
• PER2 recluta inoltre complessi di modifica della cromatina (SIN3-HDAC, metiltransferasi di H3K9) nei promotori dei geni bersaglio e nei siti di terminazione, regolando l'inizio e l'allungamento della trascrizione.
• A livello subcellulare, PER2 si localizza nel nucleo, nel citoplasma, nella regione perinucleare e nel nucleolo, spostandosi tra questi compartimenti nell'ambito della regolazione dell'orologio circadiano.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, regolano la stabilità di PER2 e la durata del periodo circadiano.
• È ampiamente espresso, con i livelli più elevati nel muscolo scheletrico e nel pancreas; l'isoforma 2 è stata rilevata nei cheratinociti. Le mutazioni di PER2 causano la sindrome familiare della fase avanzata del sonno (FASPS).
• PER2 è coinvolto nella regolazione metabolica, agendo come coattivatore di PPARA e correpressore di NR1D1, influenzando il metabolismo lipidico e i livelli di insulina.
• Mantiene inoltre la funzione cardiovascolare regolando la produzione di NO e prostaglandine e controlla l'assorbimento circadiano del glutammato nelle sinapsi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 390–565 del PER2 umano; a causa della conservazione della sequenza, può reagire crociatamente con il PER2 di topo e ratto, come indicato. Validare la reattività crociata nella specie di interesse.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 137 kDa. Utilizzare un gel di acrilammide a bassa percentuale e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si consiglia di testare diversi metodi di recupero antigenico e di confermare la specificità della colorazione in tessuti con espressione nota, come il muscolo scheletrico o il pancreas.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), includere controlli appropriati (ad esempio linee cellulari knockout o competizione con peptidi) per verificare la specificità dell'anticorpo e l'arricchimento del bersaglio.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale specifico per PER2 potrebbe migliorare la sensibilità e la specificità del saggio.

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