Anticorpo policlonale di coniglio anti-PEX12 per Western Blot e ELISA - O00623

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PEX12

• PEX12, noto anche come Peroxin-12 o PAF-3, è un componente del canale di retrotraslocazione perossisomiale che, insieme a PEX2 e PEX10, media l'esportazione del recettore PEX5 dalla membrana perossisomiale al citosol, consentendone il riciclo (PubMed:24662292, PubMed:9354782, PubMed:9632816). Riferimenti correlati: PMID:24662292 PMID:9354782 PMID:9632816

• PEX12 regola il riciclo di PEX5 attivando l'attività della ligasi E3 ubiquitina-proteina di PEX10; quando il riciclo è compromesso, stimola la poliubiquitinazione di PEX5 mediata da PEX10 per la degradazione (PubMed:24662292; stimolazione dell'ubiquitinazione per similarità). Riferimenti correlati: PMID:24662292

• La perossina-12 è una proteina integrale di membrana localizzata nella membrana del perossisoma.

• Le mutazioni in PEX12 sono associate a disturbi della biogenesi dei perossisomi, inclusi quelli dello spettro della sindrome di Zellweger.

• La proteina contiene domini a dito di zinco ed eliche transmembrana, indicando ruoli nel legame ai metalli e nell'integrazione nella membrana.

• Il peso molecolare previsto di PEX12 è di circa 40,8 kDa (UniProt), in accordo con i 41 kDa riportati per il prodotto.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 290-359) di PEX12 umano; questa selezione dell'epitopo può favorire il rilevamento della proteina a lunghezza intera.
• Per il Western blot, validare l'anticorpo in linee cellulari umane che esprimono proteine perossisomiali, come HepG2 o HeLa, includendo controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo dell'immunogeno ricombinante come antigene di riferimento per stabilire curve standard e ottimizzare le condizioni di rivestimento.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità tra lotti; si consiglia di verificare ogni nuovo lotto con standard noti.
• La reattività crociata è stata confermata per l'uomo; per applicazioni che coinvolgono altre specie, si raccomanda la validazione sperimentale.
• Ottimizzare sperimentalmente le concentrazioni di lavoro; le diluizioni iniziali tipiche per il WB sono spesso comprese nell'intervallo 1:500–1:2000, ma devono essere determinate empiricamente.

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