Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-PFKFB3 (iPFK-2) per WB, IHC-P, ELISA - Q16875

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PFKFB3

• PFKFB3 è anche noto come 6PF-2-K/Fru-2,6-P2asi isoenzima tipo cervello/placenta, iPFK-2 e antigene del carcinoma renale NY-REN-56, e questo evidenzia il suo ruolo nel metabolismo del fruttosio 2,6-bisfosfato.
• L'enzima catalizza sia la sintesi che la degradazione del fruttosio 2,6-bisfosfato, un potente attivatore allosterico della fosfofruttochinasi-1 e quindi un regolatore chiave della glicolisi.
• PFKFB3 è un enzima bifunzionale che possiede sia attività chinasi (6-fosfofrutto-2-chinasi) che fosfatasi (fruttosio-2,6-bisfosfatasi), classificandolo come enzima multifunzionale.
• Contiene domini di legame per ATP e nucleotidi, in linea con la sua attività chinasi e la classificazione come transferasi.
• La proteina è soggetta a fosforilazione, che indica un controllo regolatorio da parte delle vie di segnalazione, ed è stata identificata in analisi proteomiche su larga scala.
• L'splicing alternativo del gene PFKFB3 genera più isoforme, che si riflettono nell'intervallo di peso proteico osservato di 57–60 kDa.
• PFKFB3 è espresso in modo ubiquitico in tutti i tessuti umani, a conferma del suo ruolo fondamentale nel metabolismo cellulare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione peptidica conservata (aa 400–500), il che suggerisce che l'anticorpo può riconoscere più isoforme di PFKFB3 in campioni di uomo, topo e ratto. Validare la reattività crociata tra specie nel proprio sistema di analisi specifico.
• Per Western Blot, aspettarsi bande tra 57–60 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e testare più concentrazioni di lisato per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Nell'applicazione IHC-P, metodi standard di recupero dell'antigene (ad es. tampone citrato, pH 6.0) possono essere adatti; tuttavia, le condizioni ottimali devono essere determinate empiricamente.
• Per le applicazioni ELISA, si raccomandano titolazioni a scacchiera preliminari contro il peptide immunogeno o la proteina ricombinante per stabilire l'intervallo lineare e la sensibilità.

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