Anticorpo policlonale coniglio anti-PFKL per WB, IF/ICC, ELISA - P17858

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PFKL

• La PFKL (6-fosfofruttochinasi ATP-dipendente, tipo epatico) è anche nota come 6-fosfofruttochinasi di tipo B (PFK-B) e fosfoesochinasi. Catalizza la fosforilazione del D-fruttosio 6-fosfato in fruttosio 1,6-bisfosfato utilizzando ATP, il primo passo impegnativo della glicolisi. Riferimenti correlati: PMID:22923583
• Nei macrofagi, la PFKL regola negativamente l'esplosione ossidativa dei fagociti controllando la biosintesi del NADPH e la produzione di specie reattive dell'ossigeno, determinando un cambio metabolico verso la glicolisi dopo l'attivazione (per similarità).
• L'enzima è un enzima allosterico, soggetto alla regolazione di vari metaboliti, e esiste come omotetramero o in eterotetrameri con altre isoforme di fosfofruttochinasi (PFKM e PFKP).
• La PFKL è localizzata prevalentemente nel citoplasma, in linea con il suo ruolo nella glicolisi.
• Le modifiche post-traduzionali della PFKL includono acetilazione e fosforilazione, che possono modularne l'attività e la stabilità.
• La proteina è un membro della famiglia delle fosfofruttochinasi ed è una transferasi con siti di legame per l'ATP e per il magnesio.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 700–780 della regione C-terminale della PFKL umana. Verificare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema di campioni utilizzando controlli appropriati.
• Per il Western blot è prevista una banda specifica a circa 85 kDa. Si consiglia di utilizzare un marcatore di peso molecolare per confermare l'identità della banda.
• La reattività crociata è riportata per uomo, topo e ratto; convalidare l'anticorpo in queste specie eseguendo un controllo specifico per specie (ad esempio, lisato di tessuto).
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione; è atteso un pattern di colorazione citoplasmatica in base alla localizzazione subcellulare della proteina.
• Nell'ELISA, testare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione con PFKL ricombinante o proteina nativa da lisati cellulari; determinare sperimentalmente la diluizione ottimale dell'anticorpo.

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