Anticorpo policlonale anti-PFKM per WB, IF/ICC, ELISA - P08237

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PFKM

• PFKM (6-fosfofruttochinasi dipendente da ATP, tipo muscolare) è nota anche come isoenzima A della fosfofruttochinasi-1 (PFK-A), esochinasi fosforilata e altri alias (GSD7, PFK1, PFKA, PFKX, PFK-1, PFK-A, ATP-PFK, PPP1R122). Appartiene alla famiglia delle fosfofruttochinasi ed è l'isoforma specifica muscolare.
• PFKM catalizza la fosforilazione del D-fruttosio 6-fosfato a fruttosio 1,6-bisfosfato utilizzando ATP, rappresentando il primo passo irreversibile e limitante della velocità della glicolisi. Questa reazione impegna il glucosio nella produzione di energia.
• L'enzima è localizzato nel citoplasma, coerentemente con il suo ruolo nella via glicolitica.
• PFKM è soggetta a multiple modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, idrossilazione e glicosilazione, che possono regolare la sua attività e stabilità. È anche un enzima allosterico che risponde allo stato energetico cellulare.
• Le mutazioni in PFKM sono associate alla malattia da accumulo di glicogeno di tipo VII (GSD7, malattia di Tarui), caratterizzata da intolleranza all'esercizio e crampi muscolari dovuti a una glicolisi compromessa.
• Lo splicing alternativo genera diverse isoforme e la proteina è stata identificata attraverso studi di proteomica su larga scala come parte del proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un frammento proteico ricombinante che copre gli aminoacidi 501-780, una regione che può conferire specificità dell'isoforma; verificare la reattività crociata con altri isoenzimi PFK se richiesto.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 85 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata e condizioni di trasferimento adeguate.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), confermare la localizzazione nel citoplasma di linee cellulari muscolari o glicoliticamente attive; includere controlli appropriati per la specificità del segnale.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento; la natura policlonale dell'anticorpo può facilitare un rilevamento sensibile.
• Questo anticorpo reagisce incrociato con PFKM umano, murino e di ratto, rendendolo adatto a studi multi-specie; validare nel proprio sistema di campione specifico.

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