Anticorpo policlonale coniglio anti-PGA5 per WB, ELISA - P0DJD9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Pepsina A-5

• La Pepsina A-5 (pepsinogen-5) è una proteasi aspartilica codificata dal gene PGA5 nell'uomo. Appartiene alla famiglia delle peptidasi A1 di enzimi simili alla pepsina.
• L'enzima presenta una ampia specificità per il substrato, preferendo clivare legami peptidici che coinvolgono fenilalanina e leucina, ma idrolizzando anche molti altri legami.
• Viene secreta come zimogeno inattivo (pepsinogeno) e attivata per clivaggio autocatalitico in condizioni acide, rilasciando la pepsina A-5 attiva.
• La Pepsina A-5 funziona principalmente nella digestione proteica nello stomaco, dove contribuisce alla scomposizione delle proteine dietetiche in peptidi.
• La localizzazione subcellulare è extracellulare, venendo secreta nel lume gastrico.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la formazione di legami disolfuro, che sono critiche per la stabilità strutturale.
• Evidenze di sequenziamento proteico diretto supportano la sua esistenza ed è stata identificata in studi di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è generato contro una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 63-180 del PGA5 umano. Questa regione ricade all'interno della parte peptidica, quindi l'anticorpo potrebbe riconoscere sia la forma zimogeno (pepsinogen-5) sia la forma attiva della pepsina A-5. Gli utenti dovrebbero validare la specificità nel proprio sistema di campioni.
• Per il Western blot, le bande previste potrebbero apparire intorno a 42 kDa per la proteina a lunghezza intera; tuttavia, a causa del processamento dello zimogeno, potrebbero essere osservate bande aggiuntive di peso molecolare inferiore. Si raccomandano appropriati controlli positivi e marcatori di peso molecolare.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di blocco. La reattività crociata con altri membri della famiglia delle pepsinogeni dovrebbe essere valutata se necessario.

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