Anticorpo Policlonale Anti-PGP9.5/UCHL1 per WB, ELISA - P09936

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PGP9.5/UCHL1

• PGP9.5/UCHL1, noto anche come proteina citoplasmatica neuronale 9.5 o ubiquitina tioesterasi L1, è un membro della famiglia delle idrolasi del carbossi-terminale dell'ubiquitina, funzionando come una deubiquitinasi essenziale per il mantenimento del sistema ubiquitina-proteasoma.

• Riconosce e idrolizza specificamente la glicina C-terminale dell'ubiquitina, preservando così un pool stabile di monoubiquitina libera, cruciale sia per le vie di degradazione del proteasoma-ubiquitina che per quelle dell'autofagia-lisosoma.
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• UCHL1 partecipa a diversi processi fisiologici, tra cui il mantenimento della funzione sinaptica, della funzione cardiaca, la regolazione delle risposte infiammatorie e l'osteoclastogenesi.
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• L'enzima deubiquitina e stabilizza molteplici proteine substrato come WWTR1/TAZ, EGFR, HIF1A e BACE1, modulando così le vie di segnalazione coinvolte nella crescita cellulare, nella risposta all'ipossia e nella neurodegenerazione.
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• Attraverso la sua azione su BACE1, UCHL1 promuove la degradazione dell'enzima di scissione del precursore della proteina amiloide al sito beta 1, portando a una ridotta produzione di peptidi amiloide beta, un segno distintivo della patologia del morbo di Alzheimer.
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• A livello subcellulare, UCHL1 si localizza prevalentemente nel citoplasma ed è anche associato alla membrana del reticolo endoplasmatico.

• L'espressione tissutale è più alta nei neuroni, con la proteina rilevata nei corpi cellulari e nei processi in tutta la neocorteccia; è presente anche nelle cellule del sistema neuroendocrino diffuso e nei loro tumori, ma solo debolmente nell'ovaio. È importante notare che i livelli di UCHL1 sono ridotti nei tessuti cerebrali di pazienti con morbo di Parkinson e morbo di Alzheimer.

• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, ossidazione e prenilazione, e le varianti genetiche sono state associate a paraplegia spastica ereditaria, morbo di Parkinson e altri disturbi neurodegenerativi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la rilevazione in Western blot, è attesa una banda di circa 25 kDa; tuttavia, a causa di potenziali modificazioni post-traduzionali e aggregazione proteica, il peso molecolare osservato può variare.

• Lisati di tessuto cerebrale umano o linee cellulari di neuroblastoma (es. SH-SY5Y) possono servire come controlli positivi data l'espressione neuronale di UCHL1; campioni di cervello di topo possono essere utilizzati anche per confermare la reattività incrociata.

• Le applicazioni ELISA dovrebbero considerare l'utilizzo dell'immunogeno ricombinante (aa 59-223) come standard e includere appropriati controlli negativi per valutare la specificità.

• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale generato contro una proteina di fusione ricombinante, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere verificata e passaggi di pre-adsorbimento possono aiutare a ridurre il legame aspecifico se necessario.

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