Anticorpo Monoclonale Anti-PHF8 per WB, ELISA - Q9UPP1

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PHF8

• PHF8 (KDM7B/JHDM1F/ZNF422) è un'istone lisina demetilasi che rimuove preferenzialmente i gruppi mono- e dimetilati da H3K9 e H4K20, convertendo la cromatina represiva in uno stato attivo. Riferimenti correlati: PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• È fondamentale per la progressione del ciclo cellulare controllando la transizione G1-S e per la trascrizione del DNA ribosomiale come coattivatore dell'RNA polimerasi I. Riferimenti correlati: PMID:20622854, PMID:20531378
• L'attività demetilasica su H3K9me2 è fortemente stimolata dal legame con H3K4 trimetilato (H3K4me3), fornendo un indicatore dello stato attivo della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• PHF8 agisce in sinergia con il fattore di trascrizione ARX per sovraregolare KDM5C, promuovendo l'arricchimento di H3K4me3 negli elementi regolatori. Riferimenti correlati: PMID:31691806
• La proteina è localizzata nel nucleo e nel nucleolo, in linea con il suo ruolo regolatorio sulla cromatina e sul DNA ribosomiale.
• Possiede un dito PHD che lega H3K4me3, un dominio catalitico JmjC e un dominio a dito di zinco (ZNF422), classificandolo come regolatore della cromatina.
• È richiesto per lo sviluppo cerebrale normale; le mutazioni di perdita di funzione sono associate alla disabilità intellettiva legata all'X (MRXSSD).

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 800-900 del PHF8 umano, questo implica che l'anticorpo potrebbe riconoscere la regione C-terminale della proteina.
• Per Western blot, PHF8 ha un peso molecolare previsto di circa 118 kDa; assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel adeguata e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare.
• Data la sua localizzazione nucleare, si consigliano estrazioni nucleari o lisati di cellule intere per la rivelazione; valutare la convalida in linee cellulari umane e murine che esprimono PHF8 (ad esempio HeLa, HEK293, fibroblasti embrionali di topo).
• Per ELISA, è possibile utilizzare il formato diretto o sandwich; si consiglia di ottimizzare l'antigene di coating e la concentrazione di anticorpo.
• Essendo un modificatore di istoni con espressione dipendente dal ciclo cellulare, l'intensità del segnale può variare; includere controlli di caricamento appropriati e normalizzare rispetto al numero di cellule o alla proteina totale.

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