Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-Acetil CoA Carbossilasi 1 (S79) per WB, IF/ICC, ELISA - Q13085

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Acetil-CoA Carbossilasi 1 (ACC1)

• L'acetil-CoA carbossilasi 1 (ACC1) è codificata dal gene ACACA, anche noto come ACC1 o ACCA, ed è l'enzima limitante nella biosintesi de novo degli acidi grassi.
• Catalizza la carbossilazione ATP-dipendente dell'acetil-CoA a malonil-CoA in una reazione a due fasi che coinvolge un dominio vettore di biotina carbossilasi (PubMed:20457939, PubMed:20952656, PubMed:29899443). Riferimenti correlati: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• L'enzima si localizza nel citosol.
• L'espressione tissutale è osservata in cervello, placenta, muscolo scheletrico, tessuti renali, pancreatici e adiposi; bassa espressione nel polmone; nessun rilevamento nel fegato.
• ACC1 è una carbossilasi biotina-dipendente con siti di legame per ATP e ioni metallici (Mg2+, Mn2+). È soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione.
• Svolge un ruolo critico nel metabolismo lipidico regolando la sintesi degli acidi grassi a catena lunga essenziali per la biogenesi delle membrane e l'accumulo di energia.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, utilizzare un gel a bassa percentuale (es. 6%) per risolvere la proteina ACC1 di ~266 kDa, e includere inibitori delle fosfatasi durante la lisi per preservare la fosforilazione in S79.
• Verificare la specificità dell'anticorpo pre-incubando l'anticorpo con un peptide S79 non fosforilato per confermare il legame fosfo-dipendente.
• Nell'immunofluorescenza o ICC, aspettarsi una colorazione citoplasmatica; co-colorare con un marcatore citosolico per validare la localizzazione.
• Per l'ELISA, l'immunogeno peptide fosforilato può essere utilizzato come controllo positivo; assicurarsi che il tampone di rivestimento sia compatibile con i fosfopeptidi.
• Validare l'anticorpo in linee cellulari rilevanti che esprimono ACC1 (es. HepG2, 3T3-L1) con e senza attivazione dell'AMPK per testare il rilevamento inducibile dalla fosforilazione.

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