Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Phospho-Akt-S473 per WB, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1

• AKT1 (RAC-alfa serina/treonina-proteina chinasi) è un membro della famiglia di chinasi AKT e regola il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza cellulare, la crescita e l'angiogenesi fosforilando oltre 100 substrati a valle. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781
• Media l'assorbimento del glucosio indotto dall'insulina tramite la traslocazione di SLC2A4/GLUT4 e stimola la sintesi del glicogeno inibendo GSK3 attraverso la fosforilazione.
• AKT1 promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando e inibendo proteine pro-apoptotiche, inclusa MAP3K5/ASK1 e BAD. Riferimenti correlati: PMID:11154276 PMID:10926925
• Attiva la via di segnalazione mTORC1 fosforilando TSC2, portando ad un aumento della sintesi proteica e della crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana del mitocondrio, consentendo ruoli di segnalazione diversificati.
• L'espressione è elevata nei tumori della prostata e della mammella, e la forma fosforilata in Tyr-176 si correla con la progressione tumorale dagli stadi normali a quelli metastatici.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione in Thr-308 e Ser-473 per la piena attivazione, acetilazione, ubiquitinazione e formazione di legami disolfuro, come notato nelle parole chiave UniProt.
• L'anticorpo è diretto contro la Ser-473 fosforilata, un sito critico di attivazione conservato in AKT1 (P31749), AKT2 (P31751) e AKT3 (Q9Y243).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico intorno alla Ser-473 di AKT1 umano; questo design garantisce un'elevata specificità per l'epitopo fosforilato.
• Per il Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi e considerare l'uso di un blocco con BSA a bassa percentuale per preservare i segnali fosfo.
• Per IHC‑P, ottimizzare il recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0) e validare la colorazione in campioni con attivazione nota della via AKT, come tumori carenti di PTEN.
• Per ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento; eseguire esperimenti di titolazione incrociata per confermare la compatibilità con il formato del saggio e le condizioni del tampone.
• Includere sempre controlli positivi appropriati (es. lisati cellulari trattati con insulina o fattori di crescita) e negativi (non trattati o trattati con fosfatasi) per verificare la specificità fosfo.

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