Anticorpo monoclonale Anti-Fosfo-AKT1-S473 per WB, IHC-P, ELISA - P31749

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della proteina chinasi serina/treonina RAC-alfa (AKT1)

• AKT1 è una proteina chinasi serina/treonina che regola metabolismo, proliferazione, sopravvivenza cellulare, crescita e angiogenesi attraverso la fosforilazione di substrati a valle. Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Fosforila TBC1D4 per promuovere il trasporto del glucosio stimolato dall'insulina. Riferimenti correlati: PMID:11994271
• Attraverso la fosforilazione di TSC2, AKT1 attiva la via di segnalazione mTORC1, aumentando la sintesi proteica. Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando MAP3K5/ASK1 alla Ser-83 per inibire l'apoptosi indotta da stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11154276
• Fosforila i fattori di trascrizione FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4) per escluderli dal nucleo, sopprimendo l'espressione genica pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:10358075
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, nucleo, membrana cellulare e spazio intermembrana mitocondriale, che riflette i suoi molteplici ruoli di segnalazione.
• AKT1 è espresso in tutti i tipi di cellule umane, con livelli elevati nel cancro della prostata e della mammella; la forma fosforilata alla Ser473 è associata alla progressione tumorale.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la fosforilazione alla Ser473 e alla Thr308 per l'attivazione completa, oltre all'acetilazione e alla glicosilazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un fosfopeptide sintetico nella regione della Ser473 di Akt1 umano. La progettazione dell'immunogeno prende di mira la forma attivata di Akt1; Akt1 non fosforilato potrebbe non essere rilevato.
• Per Western blot (WB), si consiglia di utilizzare inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare gli stati di fosforilazione. Il peso molecolare previsto è 56 kDa (P31749).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e la fissazione del tessuto possono influenzare la rilevazione del fosfo-epitopo; eseguire la validazione su tessuti di controllo positivo noti (ad esempio campioni tumorali).
• Per ELISA, assicurarsi che le condizioni di rivestimento preservino il fosfo-epitopo; l'anticorpo può essere utilizzato in combinazione con un anticorpo di rilevazione di Akt1 totale per l'analisi del rapporto fosforilato/totale.
• La reattività crociata con Akt1 di topo e ratto è attesa sulla base dell'omologia di sequenza; differenze nell'accessibilità al sito fosforilato possono richiedere una validazione specifica per specie.

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