Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-AKT1-T308 per WB, IHC-P, ELISA - P31749

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1

• AKT1 è un membro della famiglia delle chinasi serina/treonina AKT (AKT1, AKT2, AKT3) che regola numerosi processi cellulari tra cui metabolismo, proliferazione, sopravvivenza cellulare, crescita e angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Funziona a valle di PI3K per mediare gli effetti di insulina, IGF1 e fattori di crescita come PDGF ed EGF. Riferimenti correlati: PMID:12176338 PMID:12964941
• Fosforila TSC2 in Ser-939 e Thr-1462, portando all'attivazione di mTORC1 e a una maggiore sintesi proteica. Riferimenti correlati: PMID:12150915 PMID:12172553
• Fosforila e inibisce MAP3K5, promuovendo la sopravvivenza cellulare in condizioni di stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11154276
• Fosforila i fattori di trascrizione FOXO (es. FOXO1 in Thr-24, Ser-256, Ser-319), portando alla loro ritenzione citoplasmatica e alla soppressione dell'espressione genica pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:10358075
• Fosforila BAD, sopprimendo così la sua attività pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:10926925
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana mitocondriale, consentendo ruoli di segnalazione diversificati.
• Ampiamente espresso nei tessuti umani; livelli proteici elevati si osservano nel cancro alla prostata e nella progressione del cancro al seno.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è mirato al sito di fosforilazione in Thr-308, un residuo critico del loop di attivazione in AKT1. Per la rilevazione di AKT1 totale, considerare un anticorpo pan-AKT separato.
• In WB, la banda attesa migra intorno a 56 kDa. Convalidare lo stato di fosforilazione trattando le cellule con stimoli come insulina o fattori di crescita; includere inibitori delle fosfatasi durante la lisi.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene. Utilizzare il blocco con fosfo-peptide e sezioni tissutali con stato di attivazione noto di AKT1 come controlli.
• Le applicazioni ELISA dovrebbero essere ottimizzate mediante titolazione a scacchiera; confermare la specificità con peptidi fosforilati e non fosforilati.
• È riportata reattività incrociata con AKT1 di topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza a livello dell'epitopo se si studiano altre specie.

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