Anti-Fosfo-AKT1 (T450) Anticorpo Monoclonale Coniglio per WB, ELISA - P31749

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1

• AKT1 è una chinasi proteica serina/treonina, una delle tre isoforme AKT strettamente correlate (AKT1, AKT2, AKT3), nota anche come Proteina Chinasi B (PKB), che regola diversi processi cellulari tra cui il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza, la crescita e l'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 media la segnalazione a valle della fosfoinositide 3-chinasi (PI3K) in risposta a fattori di crescita come insulina, IGF1, EGF e PDGF, e fosforila un'ampia gamma di substrati. Riferimenti correlati: PMID:12176338, PMID:12964941
• La fosforilazione di TSC2 a Ser-939 e Thr-1462 da parte di AKT1 porta all'attivazione della via mTORC1, promuovendo la sintesi proteica e la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 regola la sopravvivenza cellulare fosforilando e inibendo fattori pro-apoptotici come MAP3K5 (ASK1) e BAD, e attivando fattori di trascrizione della sopravvivenza come CREB1. Riferimenti correlati: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 regola il trasporto di glucosio stimolato dall'insulina fosforilando TBC1D4, che innesca il legame con le proteine 14-3-3 e facilita il trasloco di GLUT4 sulla superficie cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11994271
• La chinasi si sposta tra il citoplasma, il nucleo, la membrana cellulare e lo spazio intermembranico mitocondriale, con la fosforilazione a Thr450 (e altri siti) che influenza la sua attivazione e localizzazione.
• La chinasi è espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, con livelli proteici e fosforilazione aumentati osservati nei tumori della prostata e della mammella, evidenziando il suo ruolo di proto-oncogene.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione, l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che modulano la sua attività, stabilità e interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui circostanti Thr450 di AKT1 umano. Assicurarsi che le condizioni sperimentali preservino la fosforilazione delle proteine; considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per il Western blot (WB), l'anticorpo è progettato per riconoscere specificamente AKT1 fosforilata a Thr450. Validare la specificità del segnale utilizzando lisati trattati con fosfatasi o un controllo di blocco con peptide non fosforilato se necessario.
• L'anticorpo è adatto per applicazioni ELISA. Considerare l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento utilizzando la proteina AKT1 fosforilata purificata o il peptide.
• È stata dimostrata la reattività incrociata con AKT1 umano e di ratto. Verificare la reattività con altre specie se richiesto, poiché AKT1 T450 è altamente conservato ma potrebbe presentare lievi variazioni.
• Dato il ruolo di AKT1 in molteplici vie di segnalazione, utilizzare stimoli appropriati (es. insulina, fattori di crescita) per indurre la fosforilazione a Thr450 nel modello sperimentale.

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