Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-AKT1 (Thr450) per WB, ELISA - P31749

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT1

• AKT1 è il membro fondatore della famiglia di chinasi serina/treonina AKT, che include anche AKT2 e AKT3, e governa processi fondamentali come il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza, la crescita e l'angiogenesi (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Nella cascata di segnalazione dell'insulina, AKT1 fosforila TBC1D4 per promuovere la traslocazione di GLUT4 e l'assorbimento di glucosio (PubMed:11994271) e inibisce GSK3 per guidare la sintesi del glicogeno. Riferimenti correlati: PMID:11994271
• AKT1 supporta la sopravvivenza cellulare fosforilando direttamente e inattivando proteine pro-apoptotiche come MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276) e BAD (PubMed:10926925), e causando la ritenzione citoplasmatica dei fattori di trascrizione FOXO (PubMed:10358075). Riferimenti correlati: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:10358075
• Attraverso la fosforilazione di TSC2, AKT1 attiva mTORC1, collegando i segnali dei fattori di crescita alla sintesi proteica, alla biogenesi dei ribosomi e alla crescita cellulare (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 si sposta tra il citoplasma, il nucleo, la membrana plasmatica e lo spazio intermembrana mitocondriale; questa localizzazione dinamica è essenziale per accedere a distinti bersagli a valle.
• Ampiamente espresso nei tessuti umani, i livelli proteici di AKT1 e le fosforilazioni attivanti sono frequentemente elevati nei tumori, incluse le malignità prostatiche e mammarie, dove correlano con la progressione del tumore.
• AKT1 è soggetta a un'estesa regolazione post-traduzionale: la fosforilazione a Thr308 e Ser473 è richiesta per l'attività chinasi completa, mentre l'acetilazione, l'ubiquitinazione e la glicosilazione modulano ulteriormente la sua stabilità e funzione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), preparare lisati cellulari o tissutali con inibitori delle fosfatasi per preservare il segnale fosfo-Thr450; è prevista una banda specifica vicino a 56 kDa nei campioni umani e di topo.
• Nelle applicazioni ELISA, può essere utilizzato un fosfo-peptide corrispondente all'immunogeno come antigene di rivestimento per catturare l'anticorpo; gli utenti dovrebbero ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo per il loro saggio specifico.
• Poiché gli anticorpi policlonali possono mostrare variabilità da lotto a lotto, si raccomanda l'inclusione di controlli positivi e negativi appropriati (es. lisati trattati con fosfatasi).
• Questo anticorpo è destinato all'uso nella ricerca per rilevare la fosforilazione di AKT1; la validazione nella matrice campione dell'utente finale e nel sistema di saggio è essenziale per ottenere risultati affidabili.

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