Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-AMPKa1/AMPKa2-T183/T172 per WB, ELISA - Q13131 / P54646

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AMPKa1/AMPKa2

• La proteina chinasi attivata dal 5'-AMP (AMPK) è una chinasi serina/treonina eterotrimerica che funge da sensore energetico, mantenendo l'omeostasi energetica cellulare. Le subunità catalitiche α (α1 codificata da PRKAA1 e α2 da PRKAA2) vengono attivate in seguito a fosforilazione in Thr-183 (α1) o Thr-172 (α2) in risposta ad AMP/ADP elevati e chinasi a monte. Riferimenti correlati: PMID:17307971, PMID:17712357

• AMPK regola il metabolismo lipidico fosforilando l'acetil-CoA carbossilasi (ACACA/ACACB) e l'HMG-CoA reduttasi, inibendo così la sintesi di acidi grassi e colesterolo. Promuove anche la lipolisi attraverso la fosforilazione della lipasi ormone-sensibile (LIPE).

• Nell'omeostasi del glucosio, AMPK aumenta l'assorbimento di glucosio muscolare promuovendo la traslocazione di SLC2A4/GLUT4 e modula la gluconeogenesi epatica tramite la fosforilazione di CRTC2/TORC2. Regola anche gli enzimi glicolitici PFKFB2/3.

• AMPK controlla la crescita e la proliferazione cellulare inibendo la via mTORC1 attraverso la fosforilazione di TSC2 e RPTOR, e fosforilando FNIP1 per sopprimere la segnalazione non canonica di mTORC1, promuovendo così l'autofagia tramite l'attivazione di ULK1. Riferimenti correlati: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666

• La chinasi fosforila multipli fattori di trascrizione e co-regolatori (es. FOXO3, p53, SREBF1/2, HNF4A, CRTC2, HDAC5, MEF2C, PPARGC1A, EP300) per esercitare risposte metaboliche e di stress a lungo termine, e media la regolazione della cromatina tramite la fosforilazione dell'istone H2B. Riferimenti correlati: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171

• La localizzazione subcellulare include citoplasma, nucleo ed endosomi tardivi, permettendo ad AMPK di coordinare programmi metabolici e trascrizionali tra i compartimenti cellulari. È anche coinvolta nell'inizio dell'autofagia e nella dinamica mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:34077757, PMID:36367943

• Funzioni aggiuntive includono la regolazione del ritmo circadiano tramite la fosforilazione di CRY1, la segnalazione Wnt attraverso la stabilizzazione di CTNNB1 e l'attività di chinasi della proteina tau in presenza di amiloide-beta. AMPKα1 è anche implicata nella ferroptosi e nelle risposte all'ipossia attraverso la fosforilazione di ALDH7A1. Riferimenti correlati: PMID:31492851, PMID:40233740

• AMPKα1 subisce splicing alternativo ed è modificata da coniugazione ubiquitina-simile (Ubl). La proteina è una glicoproteina e una fosfoproteina, con attività chinasi dipendente da metalli che richiede magnesio.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un fosfopeptide sintetico che circonda il Thr-183 di AMPKα1/α2 umano; è consigliabile verificare la fosfo-specificità tramite trattamento dei lisati cellulari con λ-fosfatasi o competizione con peptide.
• Per il Western blot, è attesa una banda a circa 64–65 kDa (α1) e 62 kDa (α2). Possono comparire bande multiple a causa di variazioni isoformiche e stati di fosforilazione; utilizzare appropriati controlli negativi (blocco con peptide non fosforilato) per confermare la specificità del segnale.
• Questo anticorpo è adatto per il saggio immunoassorbente legato a un enzima (ELISA); considerare l'abbinamento con un anticorpo per AMPKα totale per normalizzare i segnali fosfo negli approcci quantitativi.
• A causa dell'elevata conservazione della sequenza, è riportata reattività crociata con AMPKα di topo e ratto; validare nel contesto di specie e tessuto pertinente.

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