Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-ATF2 (T69/T71) per WB, IHC-P, ELISA - P15336

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATF-2

• ATF-2 (fattore di trascrizione attivante 2), noto anche come CREB-2, CRE-BP1 e HB16, è un membro della famiglia ATF/CREB di fattori di trascrizione basic region-leucine zipper (bZIP), codificato dal gene ATF2.
• Funziona come attivatore trascrizionale legandosi alle sequenze consenso CRE (5'-TGACGTCA-3') o AP-1 (5'-TGACTCA-3'), regolando geni coinvolti nell'anti-apoptosi, crescita cellulare e risposta al danno del DNA.
• Esibisce intrinseca attività istone acetiltransferasi (HAT), acetilando specificamente le istoni H2B e H4 in vitro, contribuendo alla modificazione della cromatina e alla regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:10821277
• Questo anticorpo specifico per la fosforilazione rileva ATF2 fosforilato in Thr69 e Thr71 da chinasi come ATM, il che è critico per il suo ruolo nella risposta al danno del DNA, checkpoint della fase S indotto da radiazioni ionizzanti e reclutamento del complesso MRN nei foci di danno del DNA.
• Nel citoplasma, ATF2 si localizza sulla membrana esterna mitocondriale dove interagisce con HK1 e VDAC1, compromettendo il potenziale di membrana mitocondriale e promuovendo la morte cellulare, evidenziando il suo duplice ruolo nella trascrizione e nell'apoptosi.
• La proteina è espressa ubiquitariamente, con livelli più elevati nel cervello, e subisce un traffico nucleo-citoplasmico; la sua localizzazione subcellulare include il nucleo, il citoplasma e la membrana esterna del mitocondrio.
• ATF2 può avere attività oncogenica o di soppressore tumorale a seconda del contesto tissutale e modula l'attività ATM promuovendo la degradazione di KAT5 in concerto con CUL3 e RBX1.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un fosfopeptide sintetico corrispondente a Thr69 e Thr71 dell'ATF2 umano. Per la rilevazione specifica della fosforilazione, validare la specificità trattando i lisati cellulari con lambda fosfatasi o utilizzando la competizione con peptide non fosforilato.
• Per il Western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 55 kDa. Utilizzare condizioni appropriate di blocco e lavaggio e considerare l'inclusione di un cocktail di inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per preservare la fosforilazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene; si raccomanda l'ottimizzazione della diluzione dell'anticorpo e del sistema di rilevazione per ogni tipo di tessuto. Includere appropriati controlli positivi e negativi.
• La cross-reattività con ATF2 di topo e ratto consente l'utilizzo dell'anticorpo in modelli roditori, ma si consiglia l'allineamento delle sequenze e esperimenti pilota per confermare la reattività.

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