Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Phospho-ATM (S1981) per WB e ELISA - Q13315

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATM

• ATM è una proteina chinasi serina/treonina che agisce come sensore chiave del danno al DNA, attivando la segnalazione dei checkpoint in risposta a rotture a doppio filamento (DSB) e stress genotossici (PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365).
  Riferimenti correlati:
  PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Riconosce il motivo consenso [ST]-Q e fosforila numerosi target a valle, tra cui p53/TP53, CHEK2, BRCA1 e altri, per orchestrare la riparazione del DNA e l'arresto del ciclo cellulare (PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669).
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  PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669

• Un passaggio iniziale critico nella segnalazione delle DSB è la fosforilazione mediata da ATM dell'istone H2AX alla Serina139, che marca la cromatina adiacente ai siti di rottura (Per similarità).

• ATM svolge anche funzioni nell'esclusione allelica delle cellule pre-B, nello sviluppo dei linfociti T e nella trasduzione del segnale, ed è considerato un oncosoppressore.

• La chinasi si localizza nel nucleo, ma anche nelle vescicole citoplasmatiche, nel centrosoma e nei perossisomi, dove fosforila PEX5 per promuovere la pexofagia in risposta alle specie reattive dell'ossigeno (ROS) (PMID:26344566).
  Riferimenti correlati:
  PMID:26344566

• ATM fosforila ERCC6 per facilitare il rimodellamento della cromatina nelle rotture a doppio filamento del DNA (PMID:29203878), e fosforila TTC5/STRAP alla Serina203 per promuoverne la traslocazione nucleare dopo il danno al DNA (PMID:15448695).
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  PMID:29203878, PMID:15448695

• La fosforilazione di DYRK2 da parte di ATM nei siti nucleari protegge DYRK2 dall'ubiquitinazione mediata da MDM2 e dalla degradazione proteasomale dopo stress genotossico (PMID:19965871).
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  PMID:19965871

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un fosfopetide sintetico corrispondente al sito di fosforilazione S1981 dell'ATM umano; è attesa specificità solo per la forma fosforilata.
• Per Western blotting, includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisi e di lavaggio per preservare la fosforilazione. Si consiglia di verificare la fosfo-specificità trattando i campioni con lambda proteina fosfatasi o eseguendo esperimenti di blocco peptidico.
• A causa delle grandi dimensioni di ATM (~351 kDa), utilizzare un gel di acrilammide a bassa percentuale (es. 6%) e tempi di trasferimento prolungati. Anche un gel a gradiente (4-15%) può migliorare la separazione.
• Validare l'anticorpo nel vostro sistema modello specifico; la reattività crociata con il topo è riportata, ma le prestazioni in altre specie devono essere testate individualmente.
• Per ELISA, confermare le condizioni di rivestimento e rilevazione, poiché gli anticorpi fosfo-specifici possono richiedere un pH del buffer e reagenti di blocco ottimizzati.

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