Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-BRCA1 (S988) per IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della BRCA1

• La proteina di suscettibilità al cancro al seno di tipo 1 (BRCA1), nota anche come proteina 53 con dito a RING (RNF53), è una ligasi E3 ubiquitina-proteica che media specificamente la formazione di catene poliubiquitilinate legate a 'Lys-6', svolgendo un ruolo centrale nelle risposte cellulari ai danni al DNA. Riferimenti correlati: PMID:10500182 PMID:12887909 PMID:12890688
• L'eterodimero BRCA1-BARD1 coordina diverse vie tra cui la riparazione del DNA, l'ubiquitinazione e la regolazione trascrizionale per mantenere la stabilità genomica. Riferimenti correlati: PMID:12890688 PMID:14976165 PMID:20351172
• La BRCA1 è necessaria per appropriati arresti del ciclo cellulare dopo irradiazione ionizzante sia in fase S che in fase G2, e contribuisce alla riparazione per ricombinazione omologa (HRR) tramite l'interazione con PALB2 e la messa a punto del caricamento di BRCA2-RAD51 alle interruzioni del DNA. Riferimenti correlati: PMID:10724175 PMID:11836499 PMID:12183412 PMID:19369211
• Regola la nucleazione dei microtubuli del centrosoma e inibisce la sintesi dei lipidi legandosi alla ACACA fosforilata inattiva, impedendone la defosforilazione. Riferimenti correlati: PMID:18056443 PMID:16326698
• Il complesso BRCA1-RBBP8 controlla l'attivazione del checkpoint G2/M tramite l'ubiquitinazione di RBBP8, illustrando un meccanismo di regolazione diretta nella progressione del ciclo cellulare dopo il danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:16818604
• La localizzazione subcellulare include il nucleo, il cromosoma e il citoplasma, con un trasporto dinamico a seconda della fase del ciclo cellulare e dei segnali di danno al DNA.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (es. a S988), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che modulano la sua attività e le sue interazioni.
• Le isoforme 1 e 3 sono ampiamente espresse; l'isoforma 3 è spesso ridotta o assente nelle linee cellulari di cancro al seno e ovarico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a S988 della BRCA1 umana; la specificità dell'anticorpo per la forma fosforilata dovrebbe essere confermata mediante trattamento con fosfatasi o saggi di competizione.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e considerare l'uso di tessuti con nota espressione di BRCA1 (es. seno, ovaio); includere un controllo negativo utilizzando un peptide di blocco non fosforilato.
• In IF/ICC, la colorazione combinata con marcatori di danno al DNA o marcatori di fase del ciclo cellulare può fornire un contesto funzionale per la localizzazione della BRCA1.
• Il rilevamento ELISA della fosfo-BRCA1 potrebbe richiedere un'estrazione accurata e la normalizzazione ai livelli totali di BRCA1; validare la linearità e la sensibilità nella matrice di campioni pertinente.

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