Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-c-Myc (S62) per WB, IHC-P ed ELISA - P01106

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Proto-oncogenica Myc

• MYC (c-Myc) è un noto proto-oncogene e fattore di trascrizione, anche designato come proteina 39 di base helix-loop-helix di classe E (bHLHe39) o fattore di trascrizione p64. È codificato dal gene MYC ed è strettamente associato alla crescita cellulare, alla proliferazione e all'oncogenesi.
• Come fattore di trascrizione sequenza-specifico, MYC si lega al motivo canonico E-box 5'-CACGTG-3' per attivare la trascrizione di numerosi geni legati alla crescita, guidando così la progressione del ciclo cellulare e la proliferazione cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:24940000 PMID:25956029
• MYC aumenta l'espressione di VEGFA legandosi direttamente al suo promotore, promuovendo così l'angiogenesi sprouting in contesti sia fisiologici che patologici.
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• Nelle cellule staminali embrionali, MYC funge da regolatore chiave della riprogrammazione somatica e dell'auto-rinnovamento, cooperando con TAF6L per facilitare il rilascio della pausa dell'RNA polimerasi II e l'attivazione dei geni target (per similarità).
• MYC regola positivamente l'espressione di HNRNPA1, HNRNPA2 e PTBP1, che collettivamente modulano lo splicing alternativo del pre-mRNA della piruvato chinasi PKM, favorendo la produzione dell'isoforma PKM M2. Questo meccanismo è cruciale per la riprogrammazione metabolica osservata in molti tumori.
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  PMID:20010808
• A livello subcellulare, MYC si localizza prevalentemente nel nucleo—specificamente nel nucleoplasma e nel nucleolo—ma può anche spostarsi nel citoplasma e associarsi ai cromosomi, riflettendo il suo ruolo dinamico nella regolazione trascrizionale e nella dinamica della cromatina.
• La proteina è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione su multiple serina e treonina (come S62), acetilazione, O-glicosilazione e ubiquitinazione. Queste modificazioni regolano strettamente la stabilità, l'attività e l'interattoma della proteina MYC.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è generato contro un immunogeno fosfo‑specifico (un peptide di c‑Myc umano fosforilato in Ser62). Per il western blot (WB), si consiglia di preparare lisati cellulari o tissutali con inibitori delle fosfatasi e di validare la fosfo‑specificità utilizzando il trattamento con λ‑fosfatasi o un peptide non fosforilato competitivo.
• Per l'immunoistochimica (IHC‑P), sono consigliati i passaggi standard di recupero dell'antigene e blocco, e l'anticorpo può essere testato a diverse diluizioni per ottimizzare il rapporto segnale‑rumore di fondo.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; tuttavia, è necessaria un'ottimizzazione individuale del saggio e va valutata la reattività incrociata con c‑Myc non fosforilata.
• Dato il peso proteico previsto di circa 51 kDa, utilizzare un marcatore di peso molecolare appropriato e confermare la banda corretta nel sistema campione rilevante (ad es., linee cellulari umane, di topo o di ratto).
• Considerare l'uso di questo anticorpo in combinazione con anticorpi per c‑Myc totale per valutare lo stato di fosforilazione negli studi di segnalazione (ad es., via MAPK/ERK).

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