Anticorpo policlonale Anti-Fosfo-Camk2-T286 per WB, ELISA - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CaMKII

• CaMKII (Calcio/calmodulina-dipendente protein chinasi II) è una serina/treonina chinasi che forma unoloenzima composto dalle subunità α, β, γ e δ. L'anticorpo rileva la T286 fosforilata sulla subunità α (CAMK2A), un sito chiave di autofosforilazione che blocca la chinasi in uno stato attivo indipendente dal calcio.
• Nei neuroni, CaMKII è fondamentale per la maturazione delle spine dendritiche, la formazione di sinapsi e la potenziazione a lungo termine (LTP), agendo a valle dei recettori NMDA per sostenere la plasticità sinaptica e l'apprendimento dipendente dall'ippocampo. Riferimenti correlati: PMID:29100089
• La subunità β (CAMK2B) svolge anche un ruolo strutturale, legando e aggregando i filamenti di actina in modo indipendente dalla chinasi per indirizzare CAMK2A alle sinapsi e rimodellare il citoscheletro di actina durante la plasticità.
• Nel muscolo scheletrico, CaMKII contribuisce all'adattamento indotto dall'esercizio regolando la gestione del Ca²⁺ nel reticolo sarcoplasmatico: nelle fibre a contrazione lenta modula il trasporto di Ca²⁺, mentre nelle fibre a contrazione veloce controlla il rilascio di Ca²⁺ tramite fosforilazione di triadina e fosfolambano. Riferimenti correlati: PMID:16690701
• In condizioni di stress del reticolo endoplasmatico, CaMKII fosforila il regolatore della reticulofagia RETREG1 alla Serina‑151, promuovendone l'oligomerizzazione e la scissione della membrana per potenziare l'ER‑fagia. Riferimenti correlati: PMID:31930741
• La chinasi si localizza nel citoplasma, sul citoscheletro, sul centrosoma, sulla membrana del reticolo sarcoplasmatico e sulla sinapsi, in coerenza con i suoi diversi ruoli neuronali e muscolari.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che comprende la T286 di Camk2a umana; pertanto, l'anticorpo riconosce selettivamente la forma fosforilata di questo sito conservato. Per un'analisi accurata della fosforilazione, aggiungere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi e di reazione.
• Per il Western blotting, convalidare la specificità della banda trattando i campi con λ‑fosfatasi o mediante competizione con il non fosfopeptide. Il peso molecolare previsto della α‑CaMKII è ~54 kDa, ma possono comparire altre isoforme per effetto della reattività incrociata.
• Nelle applicazioni ELISA, confermare il legame fosfo-specifico confrontando i segnali ottenuti con standard di peptide fosforilato e non fosforilato.
• La reattività incrociata riportata con topo e ratto indica un'elevata conservazione della sequenza dell'epitopo T286; in ogni caso, verificare sempre la rilevazione nella specie e nel tipo di tessuto di interesse prima di procedere con studi quantitativi.

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