Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-Camk2-T286 per WB - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Camk2 (CaMKII)

• La CaMKII è una serina/treonina chinasi che funziona come complesso oloenzimatico, con la subunità beta (CAMK2B) che svolge un ruolo chiave nello sviluppo neuronale e nella plasticità (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Riferimenti correlati: PMID:16690701, PMID:29100089
• Nei neuroni, la CaMKII beta esibisce una funzione strutturale indipendente dalla chinasi legando e raggruppando i filamenti di actina, essenziale per la morfogenesi delle spine dendritiche e la plasticità sinaptica (PubMed:29100089). Riferimenti correlati: PMID:29100089
• L'autofosforilazione della CaMKII (inclusa a Thr286 in molte isoforme) dopo il legame con Ca2+/calmodulina genera attività chinasi autonoma indipendente dal Ca2+, critica per la potenziazione a lungo termine (LTP) e l'apprendimento dipendente dall'ippocampo (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Riferimenti correlati: PMID:16690701, PMID:29100089
• Nel muscolo scheletrico, la CaMKII beta regola il trasporto di Ca2+ del reticolo sarcoplasmatico fosforilando la triadina e la fosfolambano, modulando la funzione muscolare in risposta all'esercizio fisico (PubMed:16690701). Riferimenti correlati: PMID:16690701
• In condizioni di stress del RE, la CaMKII beta fosforila il regolatore della reticulofagia RETREG1 a Ser-151, promuovendo la sua oligomerizzazione e l'attività di scissione della membrana per la reticulofagia (PubMed:31930741). Riferimenti correlati: PMID:31930741
• La proteina localizza in più compartimenti cellulari, inclusi il citoplasma, il citoscheletro, il centrosoma, la membrana del reticolo sarcoplasmatico e le sinapsi, riflettendo i suoi ruoli diversificati.
• La CaMKII beta è ampiamente espressa, con livelli elevati nel cervello fetale e adulto e nel muscolo scheletrico, coerente con le sue funzioni nella neurogenesi e nella fisiologia muscolare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico attorno a T286 di Camk2 umana; questo sito è conservato attraverso le isoforme CAMK2A/B/G/D e nel topo, supportando la reattività incrociata osservata. Si consiglia di validare l'anticorpo in lisati di cervello o muscolo di topo.
• Per il western blot, prevedere una banda a circa 54 kDa corrispondente alla Camk2 fosforilata. Includere controlli di caricamento appropriati e, se possibile, un campione trattato con fosfatasi per confermare la specificità della fosforilazione.
• Nell'ELISA, utilizzare il peptide fosforilato come antigene di rivestimento e il peptide non fosforilato corrispondente come controllo negativo per valutare la specificità.
• Dato che l'anticorpo riconosce una fosforilazione dipendente dall'attivazione, ottimizzare le condizioni di stimolazione (es. trattamento con ionoforo al Ca2+ o neurotrasmettitore) per una rilevazione robusta nei modelli cellulari.
• Determinare sperimentalmente la diluizione di lavoro ottimale per ogni applicazione; le diluizioni iniziali raccomandate sono tipicamente 1:500–1:2000 per WB.

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