Anti-Fosfo-CBL-Y774 Anticorpo Policlonale di Coniglio - P22681

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CBL

• CBL (proto-oncogene del linfoma a cellule B casitas) è una ligasi E3 ubiquitina-proteina di tipo RING che funge da regolatore negativo di diverse vie di segnalazione, mediando l'ubiquitinazione dei recettori di superficie cellulare e delle chinasi associate, portando alla loro degradazione proteasomiale (PubMed:10514377, 11896602, 14661060, 14739300, 15190072, 18374639, 21596750). Riferimenti correlati: PMID:10514377 PMID:11896602 PMID:14661060 PMID:14739300 PMID:15190072 PMID:18374639 PMID:21596750

• Substrati specifici di CBL includono recettori tirosin-chinasici (es. EGFR, KIT, PDGFR), chinasi della famiglia SRC, SPRY2 e recettori immunitari come LAG3, la cui ubiquitinazione modula la segnalazione a valle o il sorting (PubMed:17094949, 17974561, 40101708, 28381567). Riferimenti correlati: PMID:17094949 PMID:17974561 PMID:40101708 PMID:28381567

• CBL svolge un ruolo critico nella segnalazione ematopoietica ed è essenziale per la differenziazione degli osteoclasti e il riassorbimento osseo. La fosforilazione a Tyr-731 promuove il reclutamento di PI3K ed è necessaria per la funzione degli osteoclasti (PubMed:14739300). Riferimenti correlati: PMID:14739300

• La proteina è localizzata nel citoplasma, nella membrana cellulare, nelle ciglia e nell'apparato di Golgi, in linea con i suoi ruoli nel traffico endocitico e nella terminazione del segnale a livello della membrana plasmatica.

• CBL contiene un dominio N-terminale conservato di legame alla tirosina-chinasi, un dominio dito di RING responsabile della sua attività di ligasi E3, e una regione C-terminale ricca di prolina con multipli siti di fosforilazione, incluso Tyr-774.

• Questo anticorpo riconosce specificamente la CBL fosforilata a Tyr-774, una modifica che probabilmente influenza le interazioni proteina-proteina e la dinamica della trasduzione del segnale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che circonda Tyr-774; l'anticorpo può rilevare preferenzialmente la CBL attivata in campioni competenti per la segnalazione. Per il Western blot (WB), considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare e validare la specificità con un blocco del peptide non fosforilato o un trattamento di defosforilazione.
• Per l'ELISA, la CBL fosforilata può essere catturata da estratti cellulari in condizioni non denaturanti; l'abbinamento con un anticorpo per la CBL totale può consentire un'analisi ratiometrica della fosfo‑proteina.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, può presentare variazioni da lotto a lotto; validare ogni nuovo lotto nel sistema sperimentale rilevante. Conservare le aliquote a -20°C o -80°C per evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento e spedire su ghiaccio per mantenere l'attività.
• Non sono disponibili dati di reattività incrociata con altre specie; per studi su modelli non umani, verificare la reattività nel proprio sistema.

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