Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-CDK9 (T186) per WB, ELISA - P50750

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CDK9

• Il CDK9 è la subunità catalitica del fattore b di allungamento della trascrizione positivo (P-TEFb), che fosforila il dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II per guidare un allungamento produttivo della trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967

• Fosforila un'ampia gamma di substrati, inclusi DSIF, NELF, MYOD1, AR e KAT5, regolando così processi come l'allungamento trascrizionale, la differenziazione muscolare e l'acetilazione degli istoni. Riferimenti correlati: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670, PMID:29335245, PMID:9857195

• Il CDK9 è essenziale per le reti di trascrizione inducibili da citochine, facilitando il riconoscimento del promotore da parte di fattori di trascrizione come RELA/p65 nella segnalazione TNF e STAT3 nella segnalazione IL-6. Riferimenti correlati: PMID:17956865, PMID:18362169

• Il P-TEFb coordina le modificazioni istoniche cotrascrizionali (H2Bub1, H3K4me3, H3K36me3) e il processing dell'mRNA, integrando l'allungamento della trascrizione con la dinamica della cromatina e la maturazione dell'RNA. Riferimenti correlati: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166

• Il CDK9 contribuisce al mantenimento dell'integrità del genoma: il complesso CDK9/ciclina-K aiuta il recupero dallo stress di replicazione, mentre l'isoforma 2 interagisce con KU70/XRCC6 per supportare la riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:20493174

• La proteina si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nei corpi PML, ed è espressa in modo ubiquitario.

• Il CDK9 è regolato dalla fosforilazione (inclusa a T186) e dall'acetilazione, e svolge un ruolo chiave nella replicazione virale, fungendo da subunità catalitica del complesso chinasi associato a Tat durante la trascrizione dell'HIV. Riferimenti correlati: PMID:10393184, PMID:11112772

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Validare la specificità fosfo-specifica confrontando i segnali di lisati non trattati e trattati con fosfatasi lambda in WB.
• L'immunogeno è un fosfopeptide; l'anticorpo può cross-reagire con il CDK9 non fosforilato—confermare con i controlli appropriati.
• Per WB, il peso molecolare previsto è 43 kDa; utilizzare marcatori pre-colorati che coprano questo intervallo e ottimizzare le condizioni di blocco e la diluzione dell'anticorpo.
• Nell'ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento esponga il motivo di fosforilazione T186; considerare l'uso di competitori fosfo-peptide per valutare la specificità.

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