Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Fosfo-Chk1-S280 per WB, ELISA - O14757

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Chk1

• La serina/treonina-proteina chinasi Chk1 (CHEK1), nota anche come chinasi checkpoint-1, è un regolatore chiave dei checkpoint del ciclo cellulare e della risposta al danno al DNA (PubMed:11535615, PubMed:12399544, PubMed:12446774). Riferimenti correlati: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Funziona fosforilando le fosfatasi della famiglia CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) su specifici residui di serina, portando alla loro inibizione tramite legame con 14-3-3 o degradazione proteasomiale, prevenendo così l'attivazione di CDK e arrestando la progressione del ciclo cellulare (PubMed:9278511, PubMed:12676583, PubMed:12676925, PubMed:12759351). Riferimenti correlati: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Fosforila TP53 su più siti C-terminali, promuovendo l'acetilazione e l'attivazione di TP53, che contribuisce all'arresto del ciclo cellulare e all'apoptosi (PubMed:10673501, PubMed:15659650, PubMed:16511572). Riferimenti correlati: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Coinvolta nella riparazione del DNA tramite ricombinazione omologa attraverso la fosforilazione di RAD51 in Thr-309, facilitando il caricamento di RAD51 sulla cromatina, e regolando FANCE nella riparazione dei cross-link (PubMed:15665856, PubMed:17296736). Riferimenti correlati: PMID:15665856, PMID:17296736
• Si localizza principalmente nel nucleo e sui cromosomi, ma si trova anche nel citoplasma e sui centrosomi, riflettendo i suoi molteplici ruoli nel mantenimento del genoma.
• Espressa in modo ubiquitario, con i livelli più alti nel timo, nei testicoli, nell'intestino tenue e nel colon.
• Contiene un dominio chinasi legante ATP ed è regolata dalla fosforilazione; classificata tra le serina/treonina-proteine chinasi e coinvolta nelle vie di danno e riparazione del DNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a S280 della Chk1 umana; confermare la specificità dell'anticorpo mediante trattamento con fosfatasi o inibizione competitiva con peptide non fosforilato.
• Questo anticorpo monoclonale di coniglio è validato per WB ed ELISA; considerare l'uso di controlli positivi appropriati (ad esempio, linee cellulari umane trattate con agenti dannosi per il DNA).
• Per il WB, includere inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi per preservare la fosforilazione; validare nel sistema di campioni pertinente.
• Il peso proteico previsto è di 54 kDa; ottimizzare di conseguenza la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento.

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