Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-Chk1-S296 per WB, ELISA - O14757

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CHK1

• CHK1 (Chinasi del checkpoint 1) è una chinasi proteina serina/treonina codificata dal gene CHEK1, esistente in più isoforme tramite splicing alternativo.
• È essenziale per l'arresto del ciclo cellulare mediato dai checkpoint e l'attivazione della riparazione del DNA in risposta al danno del DNA o DNA non replicato, preservando così l'integrità genomica. Riferimenti correlati: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• CHK1 fosforila le fosfatasi della famiglia CDC25 (CDC25A, B, C) portando alla loro inibizione e alla successiva inattivazione del complesso CDK-ciclina, che blocca la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• Fosforila direttamente TP53 in più siti C-terminali, promuovendo l'attivazione di TP53, l'arresto del ciclo cellulare e la soppressione della proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• CHK1 modula la riparazione per ricombinazione omologa fosforilando RAD51 in Thr-309, migliorando l'associazione di RAD51 alla cromatina e la riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:15665856
• Altri substrati includono FANCE (riparazione dei crosslink), TLK1 (assemblaggio della cromatina), SPRTN (reclutamento sulla cromatina), PABIR1/FAM122A (checkpoint G2/M) e istoni (regolazione trascrizionale), evidenziando il suo ruolo multifacciale nella manutenzione del genoma. Riferimenti correlati: PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• A livello subcellulare, CHK1 si localizza nel nucleo, sui cromosomi, nel citoplasma e nel centrosoma, coerente con le sue diverse funzioni nella segnalazione del danno del DNA e nel controllo del ciclo cellulare.
• CHK1 è espresso ubiquitariamente, con i livelli più alti nel timo, testicolo, intestino tenue e colon, e la sua attività è strettamente regolata dalla fosforilazione in più residui.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western Blot, includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per mantenere la fosforilazione e convalidare la dimensione della banda vicino a 54 kDa.
• Testare l'anticorpo su lisati di cellule trattate con agenti dannosi per il DNA (es. etoposide, idrossiurea) per confermare la specificità fosfo in Ser296.
• Questo anticorpo è validato per Chk1 umano; la reattività crociata con altre specie deve essere valutata individualmente.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con peptidi sia fosforilati che non fosforilati per dimostrare la fosfo-selettività.

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