Anticorpo policlonale di coniglio anti-Phospho-Chk1-S345 per WB e ELISA - O14757

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Chk1

• Chk1 è una serina/treonina-protein chinasi essenziale per il checkpoint del danno al DNA, necessaria per l'arresto del ciclo cellulare e l'attivazione della riparazione del DNA in risposta a danni al DNA o DNA non replicato. Riferimenti correlati: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Riconosce il motivo consenso del substrato [R-X-X-S/T] e fosforila CDC25A, CDC25B e CDC25C, provocandone l'inibizione tramite legame 14-3-3 e degradazione proteasomale, bloccando così l'attività CDK-ciclina e arrestando la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Chk1 subisce fosforilazione su diversi residui, e Ser-345 è un sito chiave per la sua attivazione in risposta al danno al DNA, mediando la sua attività chinasi e le funzioni di checkpoint.
• Chk1 fosforila RAD51 in Thr-309 per promuovere la riparazione per ricombinazione omologa. Riferimenti correlati: PMID:15665856
• Fosforila TP53 su più siti, aumentandone la stabilizzazione e l'attività trascrizionale per indurre l'arresto del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Chk1 si localizza nel nucleo, sui cromosomi e sui centrosomi, riflettendo il suo ruolo nei processi associati alla cromatina e nella regolazione mitotica.
• È espressa in modo ubiquitario, con livelli più alti nel timo, testicolo, intestino tenue e colon.
• Lo splicing alternativo del gene CHEK1 produce un isoforma reprimente endogena che facilita la transizione dalla fase S alla fase G2/M.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è stato progettato utilizzando un fosfopeptide sintetico corrispondente al residuo Ser-345 fosforilato della Chk1 umana. Questo garantisce la specificità per la forma attivata e fosforilata della chinasi.
• Per Western blot, si consiglia di includere inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare il segnale di fosforilazione. Convalidare la fosfato-specificità trattando i campioni con lambda fosfatasi e osservando la perdita del segnale.
• L'anticorpo è stato testato per la reattività con campioni di uomo, topo e ratto; la reattività crociata con altre specie deve essere convalidata individualmente.
• In ELISA, l'anticorpo può essere adatto per rilevare la fosfo-Chk1 in lisati cellulari o saggi basati su peptidi. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per il tuo setup specifico.
• Dato il ruolo critico di Chk1 nella risposta al danno al DNA, questo anticorpo è uno strumento utile per studiare la segnalazione dei checkpoint, la regolazione del ciclo cellulare e la biologia del cancro.

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