Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-CRK/CRKII (Y221) per WB ed ELISA - P46108

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CRK

• CRK è una molecola adattatrice che funge da proto-oncogene, trasmettendo segnali dalle tirosin chinasi agli effettori a valle tramite i suoi domini SH2 e SH3.
• Svolge un ruolo chiave nell'adesione, nello spreading e nella migrazione cellulare mediando la segnalazione BCAR1-CRK-RAPGEF1 e attivando RAP1. Riferimenti correlati: PMID:31311869
• CRK è coinvolto nel membrane ruffling e nella motilità cellulare attraverso vie dipendenti da Rac, e regola l'attivazione di MAPK8 indotta dall'attaccamento.
• Partecipa alla fagocitosi di cellule apoptotiche e alla motilità cellulare interagendo con DOCK1 e DOCK4. Riferimenti correlati: PMID:19004829
• CRK può anche regolare la segnalazione EFNA5-EPHA3, contribuendo allo sviluppo neuronale e alla repulsione cellulare.
• La proteina si localizza principalmente nel citoplasma e sulla membrana cellulare, in linea con il suo ruolo nella trasduzione del segnale nei siti di adesione.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione sui residui di tirosina (come Y221), acetilazione e splicing alternativo, che ne modulano l'attività e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico intorno a Y221; assicurare la fosfo-specificità confrontando i segnali in lisati cellulari stimolati vs. non stimolati o utilizzando un trattamento con fosfatasi.
• Per il WB, considerare l'uso di un controllo di caricamento (ad es., anticorpo per CRK totale) per normalizzare i livelli di espressione proteica.
• Convalidare la reattività dell'anticorpo nel proprio sistema di campioni specifico (umano, topo o ratto) poiché la reattività incrociata può variare in base alla conservazione della sequenza.
• Poiché il peso molecolare previsto è di ~34 kDa, eseguire marcatori di peso molecolare appropriati e verificare la dimensione della banda.
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di coating e rilevamento con l'antigene peptidico per confermare la sensibilità.

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