Anticorpo Policlonale Anti-Phospho-DRP1-S616 per WB ed ELISA - O00429

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Simile alla Dinamina-1 (DNM1L)

• DNM1L (nota anche come DRP1, DLP1, DVLP, Dymple, HdynIV, proteina correlata alla dinamina 1) è un membro della famiglia delle grandi GTPasi della dinamina, codificata dal gene DNM1L sul cromosoma 12 umano. È espressa ubiquitariamente, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, cuore, rene e cervello. Esistono multiple isoforme: l'isoforma 1 è specifica del cervello, l'isoforma 2 predomina nel testicolo, l'isoforma 3 nel muscolo scheletrico, l'isoforma 4 è debolmente espressa in cervello/cuore/rene, l'isoforma 5 in fegato/cuore/rene e l'isoforma 6 nei neuroni.
• La proteina media la divisione mitocondriale e perossisomiale oligomerizzandosi in strutture elicoidali che restringono e recidono le membrane in modo dipendente dall'idrolisi del GTP (PubMed:11514614, PubMed:12499366, PubMed:17301055, PubMed:23530241, PubMed:23584531, PubMed:33850055). Riferimenti correlati: PMID:11514614, PMID:12499366, PMID:17301055, PMID:23530241, PMID:23584531, PMID:33850055
• Il reclutamento di DNM1L ai siti di scissione mitocondriale è promosso da recettori di membrana come MFF, MIEF1 e MIEF2 (PubMed:23283981, PubMed:23921378, PubMed:29899447). L'idrolisi del GTP induce la dissociazione dai recettori e permette al filamento di arricciarsi in anelli chiusi che probabilmente recidono la doppia membrana (PubMed:29899447). Riferimenti correlati: PMID:23283981, PMID:23921378, PMID:29899447
• Svolge un ruolo essenziale nella fissione mitocondriale durante la mitosi (PubMed:19411255, PubMed:26992161, PubMed:27301544) e agisce a valle di PINK1 per promuovere la fissione in modo dipendente da PRKN (PubMed:32484300). Riferimenti correlati: PMID:19411255, PMID:26992161, PMID:27301544, PMID:32484300
• DNM1L è necessaria per il normale sviluppo del cervello, incluso il cervelletto, e garantisce la sopravvivenza dei neuroni post-mitotici sopprimendo il danno ossidativo (PubMed:17460227, PubMed:26992161, PubMed:27145208). Facilita l'apoptosi regolata dallo sviluppo durante la formazione del tubo neurale. Riferimenti correlati: PMID:17460227, PMID:26992161, PMID:27145208
• La proteina contribuisce all'apoptosi promuovendo il rilascio del citocromo c e l'attivazione delle caspasi, ed è necessaria per la necrosi programmata (PubMed:22265414). Regola anche la dinamica della membrana delle vescicole sinaptiche attraverso l'associazione con BCL2L1 (PubMed:17015472, PubMed:23792689). Riferimenti correlati: PMID:22265414, PMID:17015472, PMID:23792689
• La fosforilazione ritmica in Ser-637 fornisce un controllo circadiano della produzione mitocondriale di ATP (PubMed:29478834). Riferimenti correlati: PMID:29478834
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, membrana mitocondriale esterna, perossisomi, apparato di Golgi, vescicole rivestite di clatrina e vescicole sinaptiche. Cicla tra pool citosolici e legati alla membrana.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (es. Ser-616, Ser-637), acetilazione, S-nitrosilazione e coniugazione con ubiquitina, che ne regolano l'attività, la stabilità e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un peptide fosfo-sintetico corrispondente alla fosforilazione in Ser-616 di DRP1 umano. Per le applicazioni WB ed ELISA, considerare l'uso di campioni in cui è attesa la fosforilazione di DRP1 S616, come cellule in fissione mitocondriale attiva o apoptosi.
• Essendo un anticorpo fosfo-specifico, includere sempre inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi e validare la specificità mediante trattamento con fosfatasi o blocco con peptide non fosforilato.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione nel vostro sistema di campioni rilevante (es. lisati di HeLa, HEK293 o tessuti); un intervallo iniziale tipico per WB può essere 1:500–1:2000, ma il test empirico è essenziale.
• Per l'ELISA, confermare i protocolli di rivestimento della piastra e di rilevazione con il vostro antigene; il peptide immunogeno può servire come controllo positivo per valutare le prestazioni del saggio.

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