Anticorpo policlonale Anti-Fosfo-EGFR (T669) per WB, IP, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EGFR

• L'EGFR è un recettore tirosin chinasi che si lega ai ligandi della famiglia EGF (EGF, TGFA, AREG, ecc.), innescando la omo- o eterodimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave, avviando così molteplici vie di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• L'EGFR autofosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2, attivando almeno quattro principali vie a valle: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e moduli STAT, che regolano la proliferazione cellulare, la sopravvivenza e la migrazione. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• L'EGFR fosforila direttamente altre proteine di segnalazione, come RGS16 (attivando la sua attività GTPasica) e MUC1 (aumentando la sua interazione con SRC e beta-catenina), accoppiandosi così alla segnalazione dei recettori accoppiati a proteine G e ai processi di adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589
• La fosforilazione alla treonina 669 (T669) è un evento regolatorio critico che modula l'attività chinasica dell'EGFR e la segnalazione a valle, spesso associata all'attivazione del recettore e alla trasduzione del segnale.
• L'isoforma 2 dell'EGFR può funzionare come antagonista naturale dell'azione dell'EGF, fornendo un ulteriore livello di regolazione della segnalazione.
• L'EGFR è anche sfruttato come recettore della cellula ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C, facilitando la formazione di complessi recettoriali CD81-CLDN1.
• A livello subcellulare, l'EGFR è localizzato alla membrana cellulare, al reticolo endoplasmatico, all'apparato di Golgi, al nucleo e agli endosomi, con il traffico tra i compartimenti che influenza l'output della segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a T669; per confermare la specificità della fosforilazione, trattare i campioni con lambda fosfatasi e osservare la perdita di segnale nel Western blot.
• Per il WB, considerare l'utilizzo di una scala proteica di alta qualità nell'intervallo 130-140 kDa e includere controlli di caricamento appropriati. Validare l'anticorpo nella linea cellulare target con espressione nota di EGFR.
• Negli esperimenti di IP, ottimizzare il rapporto anticorpo-lisato e confermare l'avvenuta immunoprecipitazione tramite co-immunoprecipitazione di interattori noti dell'EGFR o tramite blot con un anticorpo pan-EGFR.
• I protocolli ELISA potrebbero richiedere la rivestimento con il peptide fosforilato o la proteina a lunghezza intera; eseguire titrazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di anticorpo e antigene.
• La reattività crociata è limitata all'EGFR umano; se si lavora con campioni di topo o ratto, validare sperimentalmente la reattività crociata o considerare reagenti specifici per la specie.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, utilizzare un anticorpo secondario anti-coniglio appropriato per il rilevamento; notare che i lotti policlonali possono variare, quindi titolare ogni nuovo lotto.

CamelBio: Il tuo ponte di approvvigionamento tutto-in-uno

CamelBio è un partner di approvvigionamento affidabile e tutto-in-uno per materie prime IVD, fornendo anticorpi validati, antigeni e reagenti ausiliari per supportare la ricerca oncologica e sulla segnalazione. Questo anticorpo policlonale anti-Fosfo-EGFR-T669 esemplifica il nostro impegno nel fornire strumenti fosfo-specifici di alta qualità per lo studio delle vie di segnalazione guidate dall'EGFR. Dagli anticorpi personalizzati in grandi quantità all'approvvigionamento di target rari, CamelBio accelera lo sviluppo diagnostico dal concetto alla clinica.