pAb di coniglio Anti-Fosfo-EGFR-Y1172 per WB, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EGFR

• EGFR è un recettore tirosin-chinasico che, dopo il legame con il ligando, attiva le principali vie di segnalazione tra cui RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e i moduli STAT, regolando così proliferazione cellulare, differenziamento e sopravvivenza. Riferimenti bibliografici: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• I ligandi riconosciuti includono EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG e HBEGF, che inducono l'omo- o l'eterodimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione sui residui di tirosina citoplasmatici. Riferimenti bibliografici: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Oltre alle vie canoniche, EGFR fosforila direttamente RGS16 (attivandone l'attività GTPasica) e MUC1 (aumentandone l'interazione con SRC e beta-catenina), collegandolo alla segnalazione dei recettori accoppiati a proteine G e all'adesione cellulare. Riferimenti bibliografici: PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFR attiva anche la segnalazione di NF-kappa-B e interagisce con CCDC88A/GIV sulla membrana cellulare per promuovere la migrazione cellulare sostenuta. Riferimenti bibliografici: PMID:11116146, PMID:20462955
• L'isoforma 2, generata da splicing alternativo, non ha attività chinasica e può agire come antagonista dell'azione dell'EGF; è espressa in modo particolare nei carcinomi ovarici.
• Subcellularmente, EGFR si localizza sulla membrana cellulare, nel reticolo endoplasmatico, nell'apparato di Golgi, negli endosomi, nel nucleo e può essere secretato, riflettendo il suo traffico dinamico e i suoi ruoli di segnalazione.
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, EGFR è classificato come fosfoproteina, tirosin-proteinchinasico e protooncogena, e funge da recettore cellulare ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un peptide fosfo-specifico intorno alla Y1172; assicurarsi che i buffer di lisiera contengano inibitori delle fosfatasi per preservare la fosforilazione.
• Per Western blot, aspettarsi una banda a circa 134 kDa in condizioni riducenti standard; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, il fosfopeptide immunogenico può essere utilizzato come controllo positivo per convalidare la specificità dell'anticorpo.
• Convalidare nella linea cellulare o nel sistema tissutale rilevante con stato di espressione e fosforilazione di EGFR noto, utilizzando se possibile campioni non trattati rispetto a campioni stimolati con EGF.

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