Anticorpo policlonale Anti-Fosfo-EIF4B-S422 per WB, ELISA - P23588

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EIF4B

• EIF4B è un fattore di inizio della traduzione eucariotico richiesto per il legame dell'mRNA ai ribosomi.
• Funziona in stretta associazione con EIF4F ed EIF4A, legandosi vicino al cappuccio terminale 5' dell'mRNA in presenza di EIF4F e ATP.
• EIF4B promuove l'attività ATPasica e l'attività di svolgimento dell'RNA dipendente da ATP sia di EIF4A che di EIF4F.
• Il gene EIF4B subisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione (coniugazione Ubl).
• Il sequenziamento proteico diretto e l'identificazione proteomica confermano la sua espressione nelle cellule umane.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato sintetico che rappresenta il sito di fosforilazione a S422; dovrebbe rilevare specificamente l'EIF4B endogeno solo quando fosforilato a questo residuo.
• Per il Western blot, considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare lo stato di fosforilazione. Validare la specificità trattando i lisati cellulari con λ-fosfatasi o per competizione con il peptide non fosforilato.
• Nell'ELISA, il peptide fosforilato può fungere da antigene di rivestimento; includere controlli appropriati usando il peptide non fosforilato per confermare la dipendenza dalla fosforilazione.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione nel sistema di campione pertinente; la reattività crociata è stata testata solo per campioni umani.

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