Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Fosfo-eIF4E-S209 per WB, ELISA - P06730

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di eIF4E

• Il fattore eucariotico di iniziazione della traduzione 4E (eIF4E) è una proteina di legame del cap dell'mRNA da 25 kDa e la subunità limitante la velocità del complesso eIF4F, che riconosce il cap 7-metilguanosina (m7G) e recluta i ribosomi per l'inizio della traduzione dipendente dal cap (PubMed:16271312, PubMed:22578813). Riferimenti correlati: PMID:16271312 PMID:22578813
• Nel nucleo, eIF4E promuove l'esportazione di un sottoinsieme di mRNA, tra cui CCND1, NOS2/iNOS e MDM2, tramite una via dipendente da XPO1, influenzando così la progressione del ciclo cellulare e l'apoptosi (PubMed:23471078, PubMed:22684010). Riferimenti correlati: PMID:23471078 PMID:22684010
• eIF4E regola anche lo splicing dell'mRNA, il processamento dell'estremità 3' e la capificazione a stato stazionario controllando l'esportazione nucleare e la traduzione degli mRNA che codificano il macchinario di splicing e capificazione (PubMed:11606200). Riferimenti correlati: PMID:11606200
• Insieme a EIF4G1, eIF4E contrasta lo scanning ed è richiesto per la traduzione mediata dall'elemento TISU, un meccanismo di inizio dipendente dal cap ma indipendente dallo scanning (PubMed:29987188). Riferimenti correlati: PMID:29987188
• Nel citoplasma, eIF4E è un componente dei corpi P e dei granuli di stress, dove partecipa alla repressione traslazionale e all'immagazzinamento dell'mRNA, regolando così la stabilità dell'mRNA (PubMed:24335285). Riferimenti correlati: PMID:24335285
• eIF4E è soggetto a fosforilazione in più siti, tra cui S209, che modula la sua affinità di legame al cap e l'attività traslazionale; è stata inoltre riportata anche l'acetilazione.
• La proteina è associata ai disturbi dello spettro autistico (AUTS19) e svolge ruoli nelle interazioni ospite-virus, sottolineando la sua ampia importanza biologica.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato ottenuto contro un fosfo-peptide sintetico corrispondente ai residui intorno alla S209; è consigliato per rilevare eIF4E fosforilato in S209, non eIF4E totale.
• Per il Western blotting, si consiglia di bloccare con BSA piuttosto che con latte per ridurre il background dovuto all'interferenza con l'epitopo fosforilato. Può essere utilizzato un controllo positivo come lisati cellulari stimolati da siero.
• Il trattamento dei lisati cellulari con lambda fosfatasi può servire come controllo negativo per confermare il segnale dipendente dalla fosforilazione.
• L'anticorpo è stato validato per ELISA; per saggi quantitativi, l'accoppiamento con un anticorpo contro eIF4E totale può fornire un riferimento di normalizzazione.

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