Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-ErbB4/HER4-Y1284 per WB, IF/ICC, ELISA - Q15303

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ErbB4/HER4

• Il recettore tirosin-chinasi proteico erbB-4 (ErbB4/HER4) è un membro della famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico (EGFR/ErbB), che include anche EGFR/ErbB1, ErbB2 ed ErbB3.
• Agisce come recettore di superficie cellulare per le neureguline (NRG1-4) e i membri della famiglia EGF (BTC, EREG, HBEGF), innescando la dimerizzazione e l'autofosforilazione per avviare le cascate di segnalazione a valle.
• Regola processi di sviluppo critici inclusa la differenziazione del muscolo cardiaco, lo sviluppo del sistema nervoso centrale (migrazione della cresta neurale e guida degli assoni) e la differenziazione e l'allattamento della mammella.
• Lo splicing alternativo genera isoforme funzionalmente distinte (es. JM-A, JM-B, CYT-1, CYT-2) che differiscono nelle capacità di segnalazione, come l'attivazione della via PI3K/AKT e la translocazione nucleare.
• Il processamento proteolitico delle isoforme JM-A rilascia domini intracellulari solubili (4ICD) che si traslocano nel nucleo per regolare la trascrizione (es. espressione di proteine del latte mediata da STAT5A) o ai mitocondri per promuovere l'apoptosi.
• La localizzazione subcellulare abbraccia la membrana cellulare, il nucleo e il mitocondrio, riflettendo i suoi diversi ruoli di segnalazione.
• Espresso ai livelli più alti nel cervello, cuore e rene, con livelli inferiori nel timo, polmone, ghiandola salivare e pancreas; l'isoforma JM-B è espressa prevalentemente nel cuore.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione della tirosina, la glicosilazione e l'ubiquitinazione, con ruoli chiave nella trasduzione del segnale e nella downregulation del recettore.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui circostanti Y1284 di ErbB4 umano; verificare la specificità utilizzando controlli trattati con fosfatasi o competizione con peptide non fosforilato nel sistema di saggio.
• Per il Western blot (WB), prevedere una banda principale a circa 147 kDa; ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per ridurre il legame non specifico, specialmente in lisati di tessuti complessi.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), includere passaggi di permeabilizzazione e validare la colocalizzazione del segnale fosforilato con marcatori di membrana o nucleari a seconda del contesto dell'isoforma.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo di una coppia di cattura/rilevamento con un anticorpo totale ErbB4 per normalizzare il segnale fosforilato e garantire accuratezza quantitativa.
• Poiché la segnalazione di ErbB4 è dipendente dal contesto, validare i risultati in linee cellulari fisiologicamente rilevanti (es. MCF-7 per mammella, H9c2 per cardiaco) con stimolazione NRG1 nota.

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