Anti-Fosfo-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 Coniglio pAb per WB, IF, ELISA - P28482 / P27361

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ERK1/ERK2

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) e MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) sono chinasi serina/treonina che funzionano come nucleo della cascata di segnalazione MAPK/ERK, regolando la crescita cellulare, l'adesione, la sopravvivenza e la differenziazione attraverso la fosforilazione di oltre 160 substrati. Riferimenti correlati: PMID:35831023
• Fosforila la chinasi fosfoglicerato PGK1 in condizioni di ipossia, dirigendola verso i mitocondri per sopprimere la produzione di acetil-CoA dal piruvato. Riferimenti correlati: PMID:26942675
• Si localizza dinamicamente tra il citoplasma e il nucleo, ed è presente anche al citoscheletro, al centrosoma, alle adesionie focali e alle caveole, collegando l'attività chinasica a specifiche funzioni subcellulari.
• La doppia fosforilazione a Thr185/Tyr187 in ERK2 (e Thr202/Tyr204 in ERK1) è essenziale per l'attivazione catalitica; questo anticorpo riconosce specificamente il loop di attivazione fosforilato.
• Agisce come un repressore trascrizionale legandosi direttamente a una sequenza consenso DNA [GC]AAA[GC], indipendentemente dalla sua attività chinasica.
• Gioca ruoli critici nella segnalazione dei recettori tirosin chinasi (es. KIT), nella segnalazione dell'insulina e nella progressione del ciclo cellulare, ed è implicato in vari tumori e disturbi dello sviluppo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico derivato dal loop di attivazione di ERK2 umano; ci si aspetta una reattività incrociata con la regione omologa fosforilata di ERK1 a causa dell'alta conservazione della sequenza.
• In WB, tipicamente appaiono bande a ~42 kDa (fosfo-ERK2) e ~44 kDa (fosfo-ERK1) dopo stimolazione; confermare la specificità fosfo confrontando con lisati non trattati o trattati con fosfatasi.
• Per IF/ICC, considerare la colorazione simultanea con un anticorpo totale ERK1/ERK2 per validare lo stato di attivazione e la translocazione subcellulare.
• Bande aggiuntive vicino a 36–43 kDa possono rappresentare varianti di splicing, modificazioni post-traduzionali o prodotti di degradazione; validare nel sistema di campione pertinente.
• Le applicazioni ELISA possono essere adatte per il rilevamento quantitativo di ERK fosforilato in lisati cellulari o tissutali; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento di conseguenza.

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