Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Phospho-FAK-Y576/Y577 per WB, ELISA - Q05397

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FAK (Focal Adhesion Kinase 1)

• FAK (PTK2) è una proteina tirosin-chinasica non recettoriale codificata dal gene PTK2; l'isoforma 6 (FRNK) manca del dominio chinasico e agisce come un inibitore endogeno della segnalazione di FAK.
• Svolge un ruolo centrale nella trasduzione del segnale mediata dalle integrine, regolando l'adesione cellulare, lo spreading, la migrazione e la riorganizzazione del citoscheletro nelle adesioni focali.
• Dopo l'attivazione, FAK forma complessi di segnalazione con le chinasi della famiglia SRC, portando alla fosforilazione di molteplici effettori a valle, inclusi i membri della famiglia CAS, e promuovendo le vie di MAP chinasi e PI3K/AKT.
• Nello specifico, FAK fosforila NEDD9 in seguito alla stimolazione delle integrine, facilitando gli effetti a valle sulla motilità cellulare. Riferimenti correlati: PMID:9360983
• A livello subcellulare, FAK si localizza nelle adesioni focali, nella corteccia cellulare, nel citoplasma perinucleare, nei centrosomi e nel nucleo, riflettendo i suoi ruoli dinamici nella segnalazione dalla membrana al nucleo.
• FAK è espresso ubiquitariamente, con rilevamento in linfociti B e T, fibroblasti e cellule epiteliali (PubMed:31630787). Riferimenti correlati: PMID:31630787
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione su più residui di tirosina (come Y576/Y577 per l'attivazione), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che modulano la sua attività chinasica, le funzioni di impalcatura e la stabilità proteica.
• Processi biologici chiave che coinvolgono FAK includono lo sviluppo embrionale, l'angiogenesi, la migrazione neuronale e la differenziazione degli osteoblasti, evidenziando la sua importanza al di là dell'adesione cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico fosforilato corrispondente ai residui che circondano Y576 e Y577 di FAK umano. Per il Western blot, considerare l'uso di un controllo positivo come lisati di cellule stimolate con fibronectina o fattori di crescita per indurre la fosforilazione di FAK.
• Per preservare i segnali di fosforilazione, includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi ed evitare una manipolazione eccessiva del campione.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con FAK di topo, consentendone l'uso in studi su modelli murini; tuttavia, si raccomanda la validazione nel sistema di campioni specifico.
• Per le applicazioni ELISA, il rivestimento con un antigene fosfo-peptidico può servire come controllo positivo per valutare la specificità dell'anticorpo.

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