Anticorpo Policlonale Rabbit Anti-Fosfo-FGFR1 (Y653/Y654) per WB, ELISA - P11362

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FGFR1

• FGFR1 è un recettore tirosin-chinasico di membrana cellulare per i fattori di crescita dei fibroblasti, essenziale per lo sviluppo embrionale, la proliferazione cellulare, la differenziazione e la migrazione.
• Il legame con il ligando attiva molteplici cascate di segnalazione tra cui le vie PLCG1, RAS-MAPK (ERK) e AKT1, che regolano la trascrizione e il destino cellulare.
• Il recettore si localizza principalmente sulla membrana cellulare, ma viene anche trasportato al nucleo, al citoplasma e alle vescicole citoplasmatiche, contribuendo alla diversità della segnalazione.
• L'espressione di FGFR1 è rilevata in astrocitomi, neuroblastomi e linee cellulari della corteccia surrenale; alcune isoforme sono presenti nei fibroblasti del prepuzio.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione dei residui tirosinici Y653 e Y654 nell'anello di attivazione, fondamentale per l'attività chinasi e la segnalazione a valle.
• FGFR1 è coinvolto in molteplici patologie tra cui la craniosinostosi, il nanismo e la sindrome di Kallmann, spesso dovute a mutazioni gain-of-function o riarrangiamenti cromosomici.
• Il recettore è una glicoproteina con proprietà di legame all'eparina e subisce ubiquitinazione e internalizzazione per la down-regolazione del segnale.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• Utilizzare inibitori di fosfatasi durante la lisi cellulare e la preparazione dei campioni per preservare lo stato di fosforilazione di FGFR1.
• Includere un controllo negativo (ad esempio lisato trattato con fosfatasi lambda) per confermare la fosfo-specificità in Western blot.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per il vostro saggio specifico; le diluizioni iniziali tipiche per WB sono 1:500–1:2000, ma devono essere determinate empiricamente.
• Validare la reattività crociata con FGFR1 di topo in tessuti o linee cellulari di topo pertinenti prima di esperimenti su larga scala.
• Per ELISA, considerare l'aggiunta di un passaggio di bloccaggio con fosfo-peptide per garantire la specificità per l'epitopo fosforilato.

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