Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-FOXO1-T24/FOXO3A-T32/FOXO4-T28 per WB, IHC-P, ELISA - Q12778 / O43524 / P98177

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FOXO1/FOXO3A/FOXO4

• FOXO1 (Forkhead box O1) è un fattore di trascrizione e un membro chiave della famiglia FOXO, che include anche FOXO3A e FOXO4—tutti e tre sono bersagli di questo anticorpo.
• FOXO1 è il principale mediatore della segnalazione insulinica, legandosi all'elemento di risposta all'insulina (IRE) per regolare l'omeostasi metabolica e l'equilibrio redox in risposta allo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• Negli epatociti, FOXO1 promuove la gluconeogenesi attivando geni come G6PC1 e PCK1, agendo in concerto con coattivatori come PPARGC1A. Riferimenti correlati: PMID:17024043
• FOXO1 è un regolatore critico della morte cellulare programmata, agendo a valle di chinasi (es. AKT1, STK4) e promuovendo l'apoptosi in neuroni, cellule muscolari lisce cardiache e cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:18356527 PMID:19221179 PMID:19483080 PMID:31063815
• Sotto condizioni di digiuno o stress ossidativo, FOXO1 induce l'autofagia in modo indipendente dalla trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:20543840
• FOXO1 si sposta dinamicamente tra il citoplasma e il nucleo; la sua localizzazione subcellulare e attività trascrizionale sono strettamente controllate da modifiche post‑traduzionali, in particolare la fosforilazione in Thr‑24 (e siti analoghi in FOXO3A/FOXO4) da parte di AKT, che determina l'esclusione nucleare.
• FOXO1 è espresso abbondantemente nel muscolo scheletrico e nell'ovaio, con livelli moderati in cuore, placenta, polmone, fegato, pancreas e altri tessuti; è rilevato anche nelle cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:9479491 PMID:19483080

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un fosfopeptide sintetico corrispondente alla regione Thr‑24 di FOXO1 umano. Basandosi sull'omologia di sequenza, si prevede che riconosca anche la Thr‑32 fosforilata di FOXO3A e la Thr‑28 di FOXO4.
• Per l'analisi Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi per preservare il segnale di fosforilazione. È attesa una banda vicina a 70 kDa per FOXO1, con dimensioni simili per FOXO3A e FOXO4.
• Quando si esegue l'immunoistochimica (IHC‑P), considerare di validare la colorazione in tessuti noti per esprimere FOXO1 (es. muscolo scheletrico, fegato) e utilizzare un controllo defosforilato per confermare la specificità fosfo‑dipendente.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso del peptide immunogeno come controllo positivo per valutare la sensibilità di rilevamento.
• Come per tutti gli anticorpi fosfo‑specifici, la pre‑assorbimento dell'anticorpo con il peptide non fosforilato può essere utilizzato per verificarne la specificità.

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